[求救]cell cytosol & membrane fraction

看板Biotech (生命科學)作者 (愛、失敗、死亡)時間11年前 (2014/03/27 13:33), 編輯推噓2(203)
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找到一個paper上寫 "Frozen tissues were powdered at liquid nitrogen temperature and homogenized in buffer A (5 mM TRIS, 4 mM EGTA, 2 mM EDTA, 5 mM dithothreitol, 1 mM phenylmethyl sulfonylfluoride and EDTA-free protease inhibitor [1 tablet/10 ml]). The homogenate was centrifuged at 100,000 X g for 30 minutes .. ... 後來跟實驗有做過得討論,有做過mitochondria fraction的 覺的說用16000xg, 轉1-2hr也可以, 但是量會比較少 因為超高速離心管要把體積補倒滿,約12mL, 這樣一下我怕濃度會太稀 請問如果改16000xg 轉1-2hr 真的可行嘛? 謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.109.40.72 ※ 文章網址: http://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1395898411.A.944.html

03/27 16:30, , 1F
做過4小時也離不出個東西
03/27 16:30, 1F

03/27 18:10, , 2F
16000g 能把membrane離下來嗎? 很懷疑
03/27 18:10, 2F

04/07 15:21, , 3F
我做過 membrane 的,是用 floatation, sucrose gradient
04/07 15:21, 3F

04/07 15:22, , 4F
基本上 membrane 會浮在兩曾之間
04/07 15:22, 4F

04/07 15:23, , 5F
But I used cultured cells
04/07 15:23, 5F
文章代碼(AID): #1JCxWhb4 (Biotech)
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