Re: [求救] 組織處理第二天才發現沒用PFA FIX

看板Biotech (生命科學)作者Dauthi (斬不斷的思緒)時間11年前 (2014/05/22 10:25)推噓1(1推 0噓 0→)

留言1則, 1人參與討論串2/2 (看更多)

※ 引述《pandagod (熊貓在這兒)》之銘言： : 請問有沒有人有這種經驗的? : dissect組織下來後通常第一天要使用PFA 隔夜來FIX組織 : 但是昨天做實驗最後竟然忘記換PFA 一直把他泡在PBS : 今天早上才發現... : 看到組織都有點軟趴趴的 : 想請問對後續的分析是否會造成影響 (免疫染色之類的) : @_@ : 請求前輩的經驗談感謝這真的很難說要看你組織degrade的速度如何如果是enzyme多的組織像是胰臟和腸黏膜之類的可能已經分解的差不多了再來就是你pbs的滲透壓是不是有調到比較等張的情形這樣泡一整晚細胞也不會膨脹炸掉另外還要考量到你所要偵測的抗原蛋白degrade的速度有的很慢才會被分解掉像是myoglobin類的這個基本上屍體死了兩三天了還是染的到但有的蛋白也很快就分解掉了保險一點我是建議用PFA固定完之後先做張H&E觀察看看細胞型態看看是否還正常畢竟你之後要觀察的蛋白也是在細胞的某些部位表現的如果細胞在H&E下面都看不出型態了就算染IHC染的到你也沒辦法判別該抗原到底在哪裡表現出來的一點建議給您看看 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.112.96.149 ※ 文章網址: http://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1400725520.A.D32.html

Re: [求救] 組織處理 第二天才發現沒用PFA FIX

Re: [求救] 組織處理第二天才發現沒用PFA FIX