Re: [求救] 第二代 Lenti packing system 質體純化

看板Biotech (生命科學)作者 ( .__________.)時間11年前 (2014/06/12 15:38), 編輯推噓2(201)
留言3則, 2人參與, 最新討論串2/2 (看更多)
※ 引述《silverberry (平行線上的交集....)》之銘言: : 最近新手上路 lentivirus transfection 做 iPS : 接到的第一個任務是準備 packing 用的載體 psPAX2 和 pMD2.G : https://www.addgene.org/mammalianrnai/Packaging/ : 2nd generation system deposited by the Trono lab : 實驗室的學妹之前純化這兩個載體, : 是從 -80 glycerol cell stock (stbl3 strain) 養小量 0.5 mL 半天, : 然後傍晚放大到 200 mL overnight 到隔天, 有可能是你養過頭啦 養過頭plasmid的產量就會變得很少。你可以試試看養在室溫overnight 或者傍晚養在37度,凌晨3~4點跟學妹一起抽plasmid。>//////< 以前我曾經因為這樣用光一整盒midiprep 還找specialist一起抓原因 也是小量抽沒問題,但是放overnight就抽不出東西..還因此換了兩三 盒新的midi-prep.. -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 211.76.175.170 ※ 文章網址: http://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1402558715.A.FA7.html

06/13 23:09, , 1F
用quick & dirty傳統法再用kit淨化呢??
06/13 23:09, 1F

07/17 10:16, , 2F
感謝 p 大~ 兩個女生在實驗室 overnight 真是一點也不
07/17 10:16, 2F

07/17 10:17, , 3F
浪漫 @ @ 我會注意一下 culture 的時間! 感謝~
07/17 10:17, 3F
文章代碼(AID): #1JcLZx-d (Biotech)
文章代碼(AID): #1JcLZx-d (Biotech)