[方法]請問WB的band要怎樣壓片讓他看起來比較圓?

看板Biotech (生命科學)作者 (沉默玩具)時間11年前 (2015/01/06 18:00), 編輯推噓2(205)
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請問各位先進 我要看大約38KDa的分子GAPDH 跑12.5% SDS-PAGE 電壓80 V 但transfer完膜染ponceau S都可以看到明顯的band 接著就是接抗體1抗1:1000 o/n 二抗1:12000 室溫1小時 但是手洗壓片,壓個五分鐘 壓出來的band都很弱而且band都扁扁的 而且band跟band之間都沒有間距看起來好像都連在一起 可以麻煩各位幫我解決這個問題嗎?? 謝謝各位^^ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 163.15.175.113 ※ 文章網址: http://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1420538444.A.4D6.html

01/06 18:08, , 1F
貼個圖上來吧!! 這樣比較容易知道問題在哪
01/06 18:08, 1F

01/06 18:35, , 2F
哪一家的GAPDH抗體要這樣做,如果常用的抗體,這條件早燒了
01/06 18:35, 2F

01/06 18:36, , 3F
其實以他的敘述來看應該是過強全黏在一起了
01/06 18:36, 3F

01/06 18:41, , 4F
我們家全新的GADPH只 hybrud 1小時就超亮了..
01/06 18:41, 4F

01/06 18:44, , 5F
GAPDH一抗1:1000....
01/06 18:44, 5F

01/06 19:53, , 6F
感覺是protein太多..
01/06 19:53, 6F

01/07 13:22, , 7F
1抗1:3000試試?
01/07 13:22, 7F
文章代碼(AID): #1Kgx9CJM (Biotech)
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