[求救] PCR定序結果 forward跟reverse完全不同
最近利用pUC18做質體的構築，
然後送給定序公司做定序，
而forward的結果是符合預期的結果，
原始檔案AB1的結果除了起頭外，
其餘都是單一的peak。
但是revers的結果大都為雜亂無章的，
也都對不上預期的序列。
主要是使用定序公司提供的primer，
看回收結果forward是M13F(-20)，
revers端則是M13R(-24)。
而詢問定序公司的結果，
則是表示我所需定序的plasmid在revers端有瑕疵的產生?
有送了三次，
因為之前主要都是只看到forward沒問題，
沒仔細再一次revers端是否正確，
三次都是相同的問題。
請問這是代表我的pUC18是有問題的嗎?
還是會有其他原因?
抑或是我的plasmid pUC18有問題嗎?
或是該如何去排除?
先在此感謝大家了~
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