[求救] 含甘油保存劑之生物樣品的蛋白質萃取方法?

看板Biotech (生命科學)作者 (Astrophyllit)時間9年前 (2016/03/10 00:38), 9年前編輯推噓5(5011)
留言16則, 8人參與, 最新討論串1/1
哥哥沒有帳號所以代p.o 可能會回覆比較慢 如題 我的樣品應含有甘油保存劑 想要萃取其蛋白質 而後進行蛋白質二維膠體電泳、尋找未知的功能性蛋白質 因樣品含甘油,不太好前處理 跪求適合的方法或protocol ----- Sent from JPTT on my Asus ASUS_Z00AD. -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 114.47.9.234 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1457541516.A.DBF.html

03/10 00:52, , 1F
標題怪怪的 ?
03/10 00:52, 1F

03/10 01:04, , 2F
跪求~含甘油保存劑之生物樣品的蛋白質萃取方法?
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03/10 01:06, , 3F
感謝告知 其實我也第一次發文 沒注意到標題字數
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※ 編輯: Astrophyllit (114.47.9.234), 03/10/2016 01:07:35

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透析
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03/10 23:29, , 5F
所以sample是什麼? suspension culture? trizol?
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phenol? cell pellet?
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透析+1,看是用透析管還是透析膜,端看你蛋白的耐受
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03/11 16:18, , 8F
03/11 16:18, 8F
wanderchang: 透析 我回答:我的樣品未知其蛋白質資訊,只知道是廠商堅稱含有酵素成分的污泥沉降劑(用於處理廢水),透析膜孔徑大小的選擇可能是一件難事!? → Ianthegood: 所以sample是什麼? suspension culture? trizol? 哈哈!我的樣品不是動物組織、植物、細胞、沒有 suspension culture 和 pellet 可言耶!但是超高速離心後倒是可以把那褐色的沉降物當成pellet,去掉上清液。 另請問trizol是萃取RNA的試劑?? → Ianthegood: phenol? cell pellet? 我回答:有人好像有建議過含油類的樣品可以用Phenol法萃取,但一開始不知道如何前處理,超高速離心,假裝它有pellet?嗚嗚 ※ 編輯: Astrophyllit (49.215.19.158), 03/11/2016 16:35:27

03/11 17:00, , 9F
跑個FPLC,用Desalting column置換成沒有甘油的buf
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03/11 18:44, , 10F
怎樣萃取蛋白?
03/11 18:44, 10F

03/11 21:35, , 11F
3k大約30個胺基酸,你的東西聽起來是個酵素,不至於
03/11 21:35, 11F

03/11 21:35, , 12F
比這還小?
03/11 21:35, 12F

03/11 21:37, , 13F
透析完再做活性測試
03/11 21:37, 13F

03/13 03:19, , 14F
蛋白過透析,還要考慮緩衝液和pH值。就怕凝集或降解。
03/13 03:19, 14F

03/14 10:49, , 15F
你的酵素很耐嗎? 用desalting column是快速的透析
03/14 10:49, 15F

03/14 10:49, , 16F
有可能變性喔!
03/14 10:49, 16F
文章代碼(AID): #1Mu56Cs_ (Biotech)
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