[求救] genotyping最近一直p不出來

看板Biotech (生命科學)作者 (Vicky)時間9年前 (2016/05/25 18:13), 編輯推噓2(2014)
留言16則, 4人參與, 最新討論串1/1
最近genotyping某個gene一直p不出來,但一樣的reagent去p另一個gene有出來。 已經trouble shooting過,包括換新的pcr grade water, reagent, primer等,依然有一樣的情形發生,所以想請教板友,謝謝。 目前的結果 http://i.imgur.com/LccVwxM.jpg
以前正常的結果 http://i.imgur.com/BVfkrrR.jpg
以前和現在的pcr條件都一樣,沒有改變 ----- Sent from JPTT on my OPPO F1f. -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 223.140.23.151 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1464171216.A.703.html

05/25 22:09, , 1F
把你的DNA稀釋就會出來了
05/25 22:09, 1F

05/25 22:40, , 2F
DNA下太多了
05/25 22:40, 2F

05/25 23:12, , 3F
有稀釋過DNA,也有放positive control(以前P得出來)
05/25 23:12, 3F

05/25 23:14, , 4F
在smear的部位隱約有清楚的major band...
05/25 23:14, 4F

05/25 23:39, , 5F
忘了說...連negative control都是一樣smear狀
05/25 23:39, 5F

05/26 10:09, , 6F
primer汙染?
05/26 10:09, 6F

05/26 10:09, , 7F
primer換新的是只重訂一隻 還是只是重新稀釋?
05/26 10:09, 7F

05/26 12:12, , 8F
全部重新訂過,用新買的pcs-grade water稀釋(在hood)
05/26 12:12, 8F

05/26 12:13, , 9F
pcr grade water
05/26 12:13, 9F

05/26 13:29, , 10F
如果全部材料都換過 就有可能是環境或是人為操作問題
05/26 13:29, 10F

05/26 13:30, , 11F
比較常見就是pipetmen的頭汙染
05/26 13:30, 11F

05/26 13:32, , 12F
能拆就拆 然後頭部分泡泡酒精 接著丟去滅菌
05/26 13:32, 12F

05/26 13:32, , 13F
如果不能拆或怕的話 做簡單滅菌也可以
05/26 13:32, 13F

05/26 13:33, , 14F
另外要注意的是之後pipet清理後記得做校正
05/26 13:33, 14F

05/26 14:38, , 15F
謝謝你,我們也懷疑是pipette污染,今天去hood操作,已
05/26 14:38, 15F

05/26 14:38, , 16F
經p出來了!
05/26 14:38, 16F
文章代碼(AID): #1NHNhGS3 (Biotech)
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