[求救] 關於石蠟切片與冷凍切片的比較問題

看板Biotech (生命科學)作者 (anber)時間9年前 (2016/06/04 08:45), 編輯推噓4(4019)
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各位好,但因為工作的關係必須了解冷凍和石蠟切片的差異 其中關於切片厚度與機台操作的細節,始終無法理解也google不到 想請教各位實際使用過的人幫忙解惑 我是紮實的門外漢 如果問了太門外漢或是不專業的用語請小力鞭 > < 我想詢問的問題關於石蠟切片與冷凍切片的比較,我的理解是否正確? *問題一:為什麼冷凍切片的建議厚度是10~30um,無法像石蠟切片的厚度一樣3~5um這麼薄 ? =>我的理解 (1) 冷凍後的組織較硬脆, 所以人員操作上不容易薄片又切的平整光滑 (2) 冷凍後的組織容易受到冰晶影響, 裁切時候如果太薄遇到室溫的瞬間薄片軟化,容易使得組織破掉 *問題二:生物組織體的切片的厚度要如何定義? 為什麼資料說細胞密集的薄切,纖維多細胞稀的可厚切? *問題三:冷凍切片時,將冷凍包埋的組織體放在機台上時, 加入一種液體讓組織體固定在低溫的平台上 (看起來像快乾這樣膠狀體),請問這是什麼液體? =>我的理解 是OCT冷凍包埋組織, 同時OCT也是用來固定平台,可在低溫中快速結凍 (參考影片https://www.youtube.com/watch?v=3l00yk51Pps
) *問題四:切片機有直立切和橫切兩種。 直立式的切片機跟上圖橫切的切片機功能有差別嗎? 厚度?或是組織體?或是冷凍或石蠟用的應用差別? 再麻煩各位了!感謝 -- posted from bbs reader hybrid on my Sony C5502 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 42.77.83.135 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1465001145.A.D78.html

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第一次手機排版,發現出現好多??,不知道怎麼修改,
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格式也怪怪的…閱讀不便請見諒。
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蠟切的樣品已經通常已經福馬林浸泡、石蠟包埋
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可切較薄 可是冰凍切僅OCT包埋 樣品較軟弱 無法切太薄
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切厚薄視技術及需求 達到目的、結果清楚 不一定要超薄
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1跟組織切片前的處理有關 冰晶是細胞內水份造成 有些實驗
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冷切前組織有先處理置換細胞內水份 就也是可以切薄一些
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但蠟切的前處理更多步驟 可切更薄 你可以查一下蠟切前處
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理的資料 2可從切片後是要看細胞的樣子排列等角度去思考
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問題 但有時切片多厚跟是什麼組織比較有關 一些比較難切
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的組織要切薄也太考驗技術了...3對 是OCT 摸起來像膠水...
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.低溫變白凝固 4都用過但不太清楚差別 平切那種似乎無法
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像垂直切的機器可以切連成一長條的...
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補充 我是指蠟切直切可以連成一長條...冷切還沒看過
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你要切之前也要找人帶你切 直接問帶的人吧
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還沒找人帶 早一步做些功課也不錯啦
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有些地方是得到處求神拜佛 憑空構築出流程
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做些功課再拜託人帶 比較有學習的誠意
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你兩種都做過後就會知道 福馬林固定後的檢體很堅固
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所以切薄沒什麼問題 而細胞多的要切薄是因為厚檢體
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細胞堆疊太多層會很難看 而結締組織這種很透的基本上
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不影響觀察 所以可以切厚 順便讓稀薄的細胞多一些
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比較好觀察 而其他的問題基本上你問帶你的人就可以了
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文章代碼(AID): #1NKYIvru (Biotech)
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