[求救] DNA疑似污染

看板Biotech (生命科學)作者 (小厚)時間9年前 (2016/06/17 16:12), 9年前編輯推噓3(3013)
留言16則, 8人參與, 最新討論串1/1
小弟最近在做transfection 用的是K2 reagent 結果剛剛去拍照 發現都死光了.. 不過神奇的是control組跟其他沒用到的well(我是種在96 well)都活的好好的,所以助理 說可能是DNA或是transfection reagent有污染 想請問有沒有人有這種經驗 DNA跟reagent又該怎麼測試呢? 另外抽midi的時候也不是在無菌室抽的 照理說沒那麼容易污染 覺得很納悶.. 或是還有其他可能也請不吝告知 謝謝 >< -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 42.73.209.15 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1466151172.A.F23.html ※ 編輯: nellnell (42.73.209.15), 06/17/2016 16:14:12

06/17 17:42, , 1F
所以你之前有其他細胞轉同一支vector進去過嗎?
06/17 17:42, 1F

06/17 17:43, , 2F
說不定是你帶的基因導致死 cell death
06/17 17:43, 2F

06/17 17:43, , 3F
通常 transfect 所需要的DNA量都不太會導致汙染
06/17 17:43, 3F

06/18 02:21, , 4F
ctrl沒死所以不是reagent吧?
06/18 02:21, 4F

06/18 07:11, , 5F
回e大 但是連pcDNA跟GFP都死了 滿納悶的..
06/18 07:11, 5F

06/18 07:12, , 6F
之前沒有做過 這是第一次做
06/18 07:12, 6F

06/18 07:13, , 7F
回lan大 我的control是什麼都沒加 連reagent都沒有QQ
06/18 07:13, 7F

06/18 14:17, , 8F
什麼都不加不叫control,pcDNA or pGFP(看你載體用那個)才叫
06/18 14:17, 8F

06/18 14:17, , 9F
control
06/18 14:17, 9F

06/18 15:04, , 10F
空載體都死,那就是reagent了吧?
06/18 15:04, 10F

06/18 15:07, , 11F
把配製 transfection mixture 的 serum-free medium 換
06/18 15:07, 11F

06/18 15:07, , 12F
成新的
06/18 15:07, 12F

06/18 22:27, , 13F
把DNA reagent 跟 serum free medium 丟到medium養看有
06/18 22:27, 13F

06/18 22:27, , 14F
沒有汙染
06/18 22:27, 14F

06/18 22:27, , 15F
分別
06/18 22:27, 15F

07/27 09:30, , 16F
你有去掉dna 的endotoxin嗎
07/27 09:30, 16F
文章代碼(AID): #1NOx44yZ (Biotech)
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