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[求救] 有人將ligation mix不小心凍去-20過嗎

看板Biotech (生命科學)作者 (phoebe)時間8年前 (2017/10/04 21:49), 編輯推噓0(0推 0噓 9→)
留言9則, 5人參與, 8年前最新討論串1/1
如題 我其實是想放4度的，但那時候腦袋轉太快在思考之後chloroform extract的流程，就不 小心把mix放去-20了…… 一個小時後想想不對趕快拿出來，但已經結凍了QQ 之後解凍了tapping一下才放去4度 不知道這樣的意外對ligation效率的影響多大 稍微思考過，覺得也許不會到很災難, T4 應該不會因此去活，buffer也不會壞掉 比較怕DNA斷掉或ATP量下降之類的 但當然還是要等明天跑膠或downstream application一run才知道 我知道像我這樣腦殘不容易…但還是想問問有沒有人有類似經驗的 謝謝orz -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 223.140.196.192 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1507124947.A.DE2.html
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10/04 22:02, 8年前 , 1F
不管是ligase,buffer,ATP,DNA,分開放時哪個你不是放-20?
10/04 22:02, 1F
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10/04 22:12, 8年前 , 2F
我也是這樣想的…，但實在是沒發生過類似的事所以有點緊張
10/04 22:12, 2F
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10/04 22:12, 8年前 , 3F
orz
10/04 22:12, 3F
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10/05 09:36, 8年前 , 4F
但是ligase在-20度的時候不會結凍，配完mix再凍會變性啊
10/05 09:36, 4F
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10/05 14:13, 8年前 , 5F
加了酵素不立刻上機？
10/05 14:13, 5F
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10/05 20:29, 8年前 , 6F
我放4度作用，都直接丟冷藏…只是那時候想太快以為自己要c
10/05 20:29, 6F
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10/05 20:29, 8年前 , 7F
hloroform extraction了…就進-20了
10/05 20:29, 7F
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10/05 23:36, 8年前 , 8F
然後結果呢~有接上嗎?
10/05 23:36, 8F
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10/06 15:13, 8年前 , 9F
有耶 好像影響不大，覺得走運…
10/06 15:13, 9F
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