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[求救] 我的RAW264.7細胞一直活化...

看板Biotech (生命科學)作者 (芋頭)時間4年前 (2020/03/06 13:00), 編輯推噓10(10推 0噓 11→)
留言21則, 10人參與, 4年前最新討論串1/1
如題，我不管是解我們實驗室的細胞或是從食工所買回來的raw264.7都會在解完之後沒多 久開始活化,也就是長腳。 我使用的medium 是直接買Gibco 的liquid的DMEM 再另外加10% low endotoxins 的FBS。 想請教各位是如何培養這株細胞避免他活化的呢？ 有沒有大佬可以提供一點這個細胞給我，本人在台中，其他地區也可以，為了畢業我願意 跑XD -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 115.82.8.126 (臺灣) ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1583470806.A.FA1.html
推
03/06 13:30, 4年前 , 1F
解細胞最好離掉DMSO 2-3天一定要換medium
03/06 13:30, 1F
→
03/06 13:32, 4年前 , 2F
大約7成滿就要繼代 不能長滿
03/06 13:32, 2F
推
03/06 17:37, 4年前 , 3F
想問版上有人raw養到完全不長腳的嗎? 我自己每次都至
03/06 17:37, 3F
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03/06 17:37, 4年前 , 4F
少會有10-15%左右長腳的...
03/06 17:37, 4F
推
03/06 20:19, 4年前 , 5F
有圖片嗎？
03/06 20:19, 5F
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03/06 20:23, 4年前 , 6F
前一陣子也很糾結長腳，但傳了幾次圖給BCRC皆說正常
03/06 20:23, 6F
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03/06 20:23, 4年前 , 7F
，滿一點會變圓。
03/06 20:23, 7F
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03/06 20:25, 4年前 , 8F
而且你有簡單測一下NO看與LPS誘導的有差別嗎？
03/06 20:25, 8F
推
03/07 14:05, 4年前 , 9F
建議第一天直接解在dish裡，隔天用PBS wash一下把DMSO
03/07 14:05, 9F
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03/07 14:05, 4年前 , 10F
洗掉，換新的medium
03/07 14:05, 10F
推
03/12 09:58, 4年前 , 11F
要加L-glutamine
03/12 09:58, 11F
推
03/16 20:42, 4年前 , 12F
ATCC上的morphology也是有長腳的 是正常的嗎？ 現在
03/16 20:42, 12F
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03/16 20:42, 4年前 , 13F
只有養老了才比較圓
03/16 20:42, 13F
推
03/17 14:42, 4年前 , 14F
建議繼代時不能用Trypsin,很容易活化,直接加PBS用力將細胞
03/17 14:42, 14F
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03/17 14:42, 4年前 , 15F
打下即可
03/17 14:42, 15F
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03/18 16:32, 4年前 , 16F
Raw容易活化 不要太糾結 不然你的人生會過的很阿雜
03/18 16:32, 16F
推
03/20 22:48, 4年前 , 17F
我後來跟 g 大一樣，只要不是整盤長腳我都繼續用orz
03/20 22:48, 17F
推
03/26 09:26, 4年前 , 18F
我會用單包裝的滅菌刮勺輕輕掛來繼代
03/26 09:26, 18F
推
06/21 20:36, 4年前 , 19F
我也是用單包裝的刮勺繼代，養在10cm dish裡，細胞泡在10m
06/21 20:36, 19F
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06/21 20:36, 4年前 , 20F
l PBS輕刮即可，沒有活化的問題。（by 博士班養了五年的我
06/21 20:36, 20F
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06/21 20:36, 4年前 , 21F
）
06/21 20:36, 21F
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