[求救] 從皮下腫瘤分離單顆細胞已刪文
各位安
我們老闆想要知道腫瘤內有什麼細胞 例如免疫細胞
老鼠LLC細胞打皮下注射
等腫瘤長大後 我們想要知道這顆腫瘤有什麼免疫細胞或是其他細胞
我上網查到一些papers
1. 先分離腫瘤組織浸泡在PBS裡剪碎
2. 剪碎的組織浸泡在
100U/mol collagenase type IV 和 100ug/ml DNase 的RPMI和有10%FBS 37度 30mins
3. pipette up and down 讓他打散成單顆細胞
4. 用70 micro filter cells 於PBS
5. 標記所以細胞的markers上flow (好像可以同時標記很多surface markers)
問題
1. 因為我想要知道有甚麼細胞在裡面 collagenase type IV 夠用嗎 還是需要type I?
2. 有更好的protocol嗎?
感謝
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