Re: [問題] apoptpsis vs.necrosis
在顯微鏡下看起來都OK
也沒有什麼死亡細胞或感覺怪怪的
可是最近連control組都出現一堆應該是損傷
而且是這些樣子
http://photo.pchome.com.tw/makeus21/03/
和平常看到的不太一樣
暴露組也是
吊詭的是
我一次做4片control好了
有時候有一片完全沒事 (就是不太有損傷圓圓的圖形)
我想不透為什麼會出現這些樣式
可能死亡或是損傷我很confuse吧 不太懂
理論上應該看到的是損傷而已?
但有些paper會說fan-like的尾部為apoptosis
還是說不能這樣判斷?
跑膠的方式:
在玻片浸泡電泳液之前,先將電泳液倒入電泳槽(4度C)預冷
then浸泡電泳液20分鐘,最旁邊放空白玻片(我的玻片會置於電泳槽中間,目前八片)
兩片兩片平行擺放共六排(兩片空白片占兩排),兩片之間緊連
以300mA、24V跑20分鐘 (一直都在4度C)
跑膠的方式大概是這樣
要看DNA損傷程度,以CASP軟體分析
想要知道目前跑出來的樣子是怎麼產生? 是損傷還是死亡?
為什麼控制組就會出現一堆呢 不然就是整片沒事
謝謝
※ 引述《Brunhilde (不見。)》之銘言:
: 是這樣的
: 我正在做comet assay
: 最近的顯示結果和往常都不一樣
: 在control組的時候就出現大量損傷
: (理論上不應該這樣)
: 但我判別不出他是哪一種死亡 (apoptosis or necrosis..)
: (不過我暴露組同control也是一樣的情形 不過死亡的樣子和之前不一樣)
: 這個問題拖了好幾個禮拜
: 老師每次都問我
: 發生這兩種死亡的時間的先後順序?
: apoptosis necrosis對膜和細胞質變化的時間?
: 等等
: 那依理論來判斷我的comet圖像為哪一種損傷
: 另外 會不會有可能兩種死亡在時期不同 圖像會分辨不出來?
: 但我一直找不出答案
: ※ 引述《Brunhilde (不見。)》之銘言:
: : 想請問如果細胞發生這兩種死亡
: : 哪一個會先發生
: : 受到傷害之後多久會發生
: : DNA這不同時間的變化情形 等等
: : 請問還有哪裡可以找到這方面資料
: : 我找了好久找不到 謝謝
※ 引述《Brunhilde (不見。)》之銘言:
: 是這樣的
: 我正在做comet assay
: 最近的顯示結果和往常都不一樣
: 在control組的時候就出現大量損傷
: (理論上不應該這樣)
: 但我判別不出他是哪一種死亡 (apoptosis or necrosis..)
: (不過我暴露組同control也是一樣的情形 不過死亡的樣子和之前不一樣)
: 這個問題拖了好幾個禮拜
: 老師每次都問我
: 發生這兩種死亡的時間的先後順序?
: apoptosis necrosis對膜和細胞質變化的時間?
: 等等
: 那依理論來判斷我的comet圖像為哪一種損傷
: 另外 會不會有可能兩種死亡在時期不同 圖像會分辨不出來?
: 但我一直找不出答案
: ※ 引述《Brunhilde (不見。)》之銘言:
: : 想請問如果細胞發生這兩種死亡
: : 哪一個會先發生
: : 受到傷害之後多久會發生
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◆ From: 220.229.173.1
推
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※ 編輯: Brunhilde 來自: 220.229.173.1 (01/13 01:49)
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