Re: [問題] apoptpsis vs.necrosis

看板Biology (生物學)作者 (不見。)時間18年前 (2008/01/12 21:56), 編輯推噓1(104)
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在顯微鏡下看起來都OK 也沒有什麼死亡細胞或感覺怪怪的 可是最近連control組都出現一堆應該是損傷 而且是這些樣子 http://photo.pchome.com.tw/makeus21/03/ 和平常看到的不太一樣 暴露組也是 吊詭的是 我一次做4片control好了 有時候有一片完全沒事 (就是不太有損傷圓圓的圖形) 我想不透為什麼會出現這些樣式 可能死亡或是損傷我很confuse吧 不太懂 理論上應該看到的是損傷而已? 但有些paper會說fan-like的尾部為apoptosis 還是說不能這樣判斷? 跑膠的方式: 在玻片浸泡電泳液之前,先將電泳液倒入電泳槽(4度C)預冷 then浸泡電泳液20分鐘,最旁邊放空白玻片(我的玻片會置於電泳槽中間,目前八片) 兩片兩片平行擺放共六排(兩片空白片占兩排),兩片之間緊連 以300mA、24V跑20分鐘 (一直都在4度C) 跑膠的方式大概是這樣 要看DNA損傷程度,以CASP軟體分析 想要知道目前跑出來的樣子是怎麼產生? 是損傷還是死亡? 為什麼控制組就會出現一堆呢 不然就是整片沒事 謝謝 ※ 引述《Brunhilde (不見。)》之銘言: : 是這樣的 : 我正在做comet assay : 最近的顯示結果和往常都不一樣 : 在control組的時候就出現大量損傷 : (理論上不應該這樣) : 但我判別不出他是哪一種死亡 (apoptosis or necrosis..) : (不過我暴露組同control也是一樣的情形 不過死亡的樣子和之前不一樣) : 這個問題拖了好幾個禮拜 : 老師每次都問我 : 發生這兩種死亡的時間的先後順序? : apoptosis necrosis對膜和細胞質變化的時間? : 等等 : 那依理論來判斷我的comet圖像為哪一種損傷 : 另外 會不會有可能兩種死亡在時期不同 圖像會分辨不出來? : 但我一直找不出答案 : ※ 引述《Brunhilde (不見。)》之銘言: : : 想請問如果細胞發生這兩種死亡 : : 哪一個會先發生 : : 受到傷害之後多久會發生 : : DNA這不同時間的變化情形 等等 : : 請問還有哪裡可以找到這方面資料 : : 我找了好久找不到 謝謝 ※ 引述《Brunhilde (不見。)》之銘言: : 是這樣的 : 我正在做comet assay : 最近的顯示結果和往常都不一樣 : 在control組的時候就出現大量損傷 : (理論上不應該這樣) : 但我判別不出他是哪一種死亡 (apoptosis or necrosis..) : (不過我暴露組同control也是一樣的情形 不過死亡的樣子和之前不一樣) : 這個問題拖了好幾個禮拜 : 老師每次都問我 : 發生這兩種死亡的時間的先後順序? : apoptosis necrosis對膜和細胞質變化的時間? : 等等 : 那依理論來判斷我的comet圖像為哪一種損傷 : 另外 會不會有可能兩種死亡在時期不同 圖像會分辨不出來? : 但我一直找不出答案 : ※ 引述《Brunhilde (不見。)》之銘言: : : 想請問如果細胞發生這兩種死亡 : : 哪一個會先發生 : : 受到傷害之後多久會發生 : : DNA這不同時間的變化情形 等等 : : 請問還有哪裡可以找到這方面資料 : : 我找了好久找不到 謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 220.229.173.1

01/12 22:46, , 1F
連結錯誤? and連po三篇表示你很急了,何不
01/12 22:46, 1F

01/12 22:47, , 2F
順便提及你跑gel的方式與到底要分析啥結果?
01/12 22:47, 2F
※ 編輯: Brunhilde 來自: 220.229.173.1 (01/13 01:31) ※ 編輯: Brunhilde 來自: 220.229.173.1 (01/13 01:49)

01/20 00:10, , 3F
用DAPI看看有沒有apoptoti body吧
01/20 00:10, 3F

01/20 00:12, , 4F
或者用PI/Annexin V看看膜是否外翻
01/20 00:12, 4F

01/20 00:14, , 5F
也可看看凋亡中的細胞是比原先脹大還是縮小
01/20 00:14, 5F
文章代碼(AID): #17YCRuRx (Biology)
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