Re: 請問有關western blotting的問題
> ==> fatee.bbs@bbs.ccns.ncku.edu.tw (酒後駕車) 的文章中提到:
> 我跑western blotting一直跑的很醜...
> 像是在run stacking gel時...sample老是壓不平..
該查一下stacking gel buffer:應是0.5M Tris-HCl, pH 6.8
另外sample buffer配方、與sample 比例是否正確?
> 或是呈色時整個背景會髒...但是我blocking都overnight..
要注重每個步驟間的清洗,這才是決定背景乾淨與否的關鍵。
> 再來就是呈色出來的band會散掉...
membrane是否用對面了?!不論NC或是PVDF,代轉印面都是較粗糙的那面。
> 試了好幾次都這樣...覺得很沮喪....
> 有人可以教教我嗎...--~~
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