[問題] 我的plate讓我很像cloning菜鳥…
看板Biotech (生命科學)作者chiasaiqueen (其實是水桶腰)時間19年前 (2006/03/27 02:17)推噓5(5推 0噓 5→)留言10則, 4人參與討論串1/3 (看更多)
做cloning做那麼久了，第一次覺得自己像個什麼都不知道的菜鳥…
事情是這樣的，我做subcloning，直接拿ligation reaction去transform,
用的是DH5a, heat-shock 2 min, recover 50 min,
長在LB/ampicillin plate(100 ug/ml)上，
過了20小時(是的，有點久…我認錯…)去收，
結果發現plate上很多colony都一大坨 水水的，
以前有一次做TA cloning也這樣(那時是16小時去收)，
不過那次有做藍白篩選，所以我挑看起來長得像colony的東西去養、去切，
6顆裡面有4顆是對的…
重點是，
如果是incubate太久，不是都會有satellite現象嗎?
這樣子"水水的"的現象是什麼造成的?
是plate太濕嗎?(我在plating之前有在hood開一點點吹個十分鐘)
感謝版上達人解惑~
有圖有真相：http://www.wretch.cc/album/blackhottie
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
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