Re: [問題] 我的plate讓我很像cloning菜鳥…
※ 引述《chiasaiqueen.bbs@ptt.cc (其實是水桶腰)》之銘言:
: 做cloning做那麼久了,第一次覺得自己像個什麼都不知道的菜鳥…
: 事情是這樣的,我做subcloning,直接拿ligation reaction去transform,
: 用的是DH5a, heat-shock 2 min, recover 50 min,
: 長在LB/ampicillin plate(100 ug/ml)上,
: 過了20小時(是的,有點久…我認錯…)去收,
: 結果發現plate上很多colony都一大坨 水水的,
: 以前有一次做TA cloning也這樣(那時是16小時去收),
: 不過那次有做藍白篩選,所以我挑看起來長得像colony的東西去養、去切,
: 6顆裡面有4顆是對的…
: 重點是,
: 如果是incubate太久,不是都會有satellite現象嗎?
: 這樣子"水水的"的現象是什麼造成的?
: 是plate太濕嗎?(我在plating之前有在hood開一點點吹個十分鐘)
: 感謝版上達人解惑~
: 有圖有真相:http://www.wretch.cc/album/blackhottie
你的plate是放在37℃的incubator嗎?
我們實驗室通常會把plate用倒放的方式incubate for overnight
如此一來可以避免產生水氣而影響colony的生長
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03/28 20:14, , 1F
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