Re: [問題] 我的plate讓我很像cloning菜鳥…
※ 引述《chiasaiqueen.bbs@ptt.cc (其實是水桶腰)》之銘言：
> 做cloning做那麼久了，第一次覺得自己像個什麼都不知道的菜鳥…
> 事情是這樣的，我做subcloning，直接拿ligation reaction去transform,
> 用的是DH5a, heat-shock 2 min, recover 50 min,
> 長在LB/ampicillin plate(100 ug/ml)上，
> 過了20小時(是的，有點久…我認錯…)去收，
> 結果發現plate上很多colony都一大坨 水水的，
> 以前有一次做TA cloning也這樣(那時是16小時去收)，
> 不過那次有做藍白篩選，所以我挑看起來長得像colony的東西去養、去切，
> 6顆裡面有4顆是對的…
> 重點是，
> 如果是incubate太久，不是都會有satellite現象嗎?
> 這樣子"水水的"的現象是什麼造成的?
> 是plate太濕嗎?(我在plating之前有在hood開一點點吹個十分鐘)
> 感謝版上達人解惑~
> 有圖有真相：http://www.wretch.cc/album/blackhottie
我覺得應該是incubate太久了
satellite也長大了
而你要的colony長的太大 部分連在一起 就變水水的
我有時養太久也是這樣
不過奇怪的是有時養很久colony長到一定的程度就不太會變大
但有時又長的很大
為何會這樣我也不太了解
--
如果美麗必須成為過去
別忘了臨走時
請將記憶裝入行囊
順便關上曾經為你而開的窗
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