Re: [問題] 有人在做細菌的standard curve嗎?
※ 引述《spunka ()》之銘言：
: 目前我在定E.coli的standard curve
: 如 OD值所對應的菌數
: 但是細節部分--如何適當培養(是否要orbitally shake或怎麼放大)搞不太清楚
: 因為將來要做抑菌測試
: 所以standard curve很重要
: 不知道有沒有人跟我做類似的題目
: 可以討論看看嗎?
無論你是否搖晃培養都註明就可以了
測量方法有很多種
1. 直接量OD值，由於E.coli生長的速度挺快
看你想要多精準的生長曲線，可以半小時或一小時測一次
2. 塗plate法，一樣每半小時或一小時，取一定量菌液
塗plate，隔天計算菌落數，一隻菌會長成一個菌落（均勻的話）
由於單位一般是使用 菌數/ml
但是你塗plate用 1ml 到最後可能會算到炸掉
所以自動減少量，最後換算時再乘回去
另外，一般使用這種方法最好稀釋幾次
就是取1ml到空試管，加入9ml medium，重複兩三次
不然菌落太多算不完也長不下
3. 使用顯微計算盤，如果使用標準的顯微計算盤
我記得裡面16小格（1大格）的體積是 0.1ul
直接在顯微鏡下數菌數，然後再乘一萬倍
即為菌數
如果你只是做報告，就選一種用，只是每種方法都最好重複三次以上確定無誤
如果你跟我一樣無聊，可以同時使用
最後可以畫出三條幾乎重疊的曲線，比較有可信度
不過要練習一下就是了
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