Re: [問題] 有人在做細菌的standard curve嗎?
※ 引述《pooldodo (破渡渡)》之銘言:
: ※ 引述《spunka ()》之銘言:
: 無論你是否搖晃培養都註明就可以了
: 測量方法有很多種
: 2. 塗plate法,一樣每半小時或一小時,取一定量菌液
: 塗plate,隔天計算菌落數,一隻菌會長成一個菌落(均勻的話)
: 由於單位一般是使用 菌數/ml
: 但是你塗plate用 1ml 到最後可能會算到炸掉
: 所以自動減少量,最後換算時再乘回去
: 另外,一般使用這種方法最好稀釋幾次
: 就是取1ml到空試管,加入9ml medium,重複兩三次
: 不然菌落太多算不完也長不下
E. coli的分裂一次只要20分鐘
我目前是先挑single colony至3 ml的培養液 搖100rpm 37度 20小時
隔天以1:100稀釋到比較大量的培養液 再次培養16小時(100rpm 37度)
16小時過後
打算至於冰上 做稀釋(x 0.8x 0.6x 0.4x 0.2x)
然後再將上述的倍數以serial dilution的方法稀釋後塗於plate上
培養一天之後 隔天數菌
目前我的問題是 第二次的培養 會不會造成細菌長太好而decline
因為我記得以前培養competent的菌 只要狂搖2hr就可以開始做了...
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