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[問題] 蛋白質表現相關問題~~

看板Biotech (生命科學)作者時間19年前 (2006/07/01 00:27), 編輯推噓0(0推 0噓 0→)
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這是我第一次做蛋白質表現... 我的是帶有his-tag的蛋白質...於E. coli中表現... 用Ni-NTA進行純化... 目前的問題是...我懷疑是因為表現量太高...所以我的蛋白在pellet的部分... 就我所知, 透過調整培養條件等等...可以將pellet的蛋白變成在supernatant中... 我之前的條件...37度, 0.5 mM IPTG, 6小時 我在想...將溫度改成30度...減少IPTG的量...不過不知道該減少到多少... induction的時間是否需要調整... 因此想請教有相關經驗的大大~~能否提供一些經驗分享~~ ...另外想問我的觀念是否正確... 之所以可以將pellet中的蛋白變到supernatant中... 主要是因為透過培養條件的調整, 使蛋白的表現量下降... 這樣的觀念對嗎?? 先謝過~~:) -- ※ 發信站: 批踢踢參(ptt3.cc) ◆ From: 128.211.176.226
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