[問題] DNA elute後大小變了

看板Biotech (生命科學)作者 (我是? ￾    )時間19年前 (2006/08/14 17:10), 編輯推噓3(301)
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之前把PCR product接到TA vector確定insert進去後 現在要把insert用RE切下來 (double digest) RE過後 先用平常DNA電泳的agarose(1.5%)跑過 確定有東西且在"1500bp"左右 現在問題來了.... 我把相同的RE後產物 跑完low melting agarose (我們家用同樣agarose粉末 不過是配成0.8%的膠) 切膠、用kit把DNA elute出來 再跑電泳(1.5%膠)確定 結果大小卻掉到"1000bp"多一點...... 想請問這什麼回事... 只是經過切膠純化怎麼大小就變了...實在不敢確定那是我要的insert片段 可以指點我一下嗎...謝謝^^ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.127.215.12

08/14 19:23, , 1F
RE的產物已經確定過了 為什麼還要跑膠, 再用Kit elute?
08/14 19:23, 1F

08/14 19:25, , 2F
若只是想洗掉那些buffer, 直接拿gel extract的kit洗就好
08/14 19:25, 2F

08/14 20:13, , 3F
至少烏鴉的實驗室是這樣子做的:P (略過溶膠的buffer)
08/14 20:13, 3F

08/14 22:02, , 4F
喔喔 因為我要ligation到另一個vector做表現
08/14 22:02, 4F
文章代碼(AID): #14u3uM8c (Biotech)
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