PTT職涯區 / Biotech (生命科學)

Re: [問題] 如何計算RT的效率呢?

看板Biotech (生命科學)作者 (學鋼琴，左手怎麼那麼笨)時間19年前 (2006/11/20 12:16), 編輯推噓4(4推 0噓 0→)
留言4則, 3人參與, 最新討論串2/3 (看更多)
※ 引述《hychou (布丁)》之銘言： : 板上的前輩們好, : 最近在進行RT-PCR,所用的RT為invitrogen的superscript III : RT前我先測了total RNA濃度後,以5ug RNA去RT (reaction vol.=20ul) : RT結束,我取1ul cDNA來測濃度, 100x稀釋 OD260=0.299 : 其濃度計算是否為0.299x40x100=1.196ng/ul : 這樣算的話cDNA不就有1.196x20=23.92ng @@(昏) : 請問前輩們,究竟哪裡出了問題? : 我用random primer來RT,應該不會有影響吧?! : 另外,這批RNA的ratio大概都在1.6左右, : 這樣是否會影響之後的real time PCR反應? : 我最煩惱的是standard curve是否會做不好? : 謝謝大家幫忙!! RT後的cDNA應該無法測cDNA濃度！ 您想一下ribonucleotide測濃度原理即知 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.114.100.165 ※ 編輯: aggaci 來自: 140.114.100.165 (11/20 12:20)
推
11/20 13:17, , 1F
請問是否因為spectrophotometer只能測pure DNA or RNA?
11/20 13:17, 1F
推
11/20 14:39, , 2F
dNTP也會吸光
11/20 14:39, 2F
推
11/20 15:24, , 3F
謝謝前輩的指教(恍然大悟貌)
11/20 15:24, 3F
推
11/20 18:49, , 4F
O_O 原來是這樣啊……
11/20 18:49, 4F
‣ 更多 aggaci 的文章
文章代碼(AID): #15OIm8Ub (Biotech)
討論串 (同標題文章)
本文引述了以下文章的的內容：
以下文章回應了本文：
完整討論串 (本文為第 2 之 3 篇)：
排序： 最新先 | 最舊先 | 留言數
在新視窗開啟完整討論串 (共3篇)
Biotech 近期熱門文章
更多 近期熱門文章 >>
PTT職涯區 即時熱門文章
更多 即時熱門文章 >>
‣ 更多 aggaci 的文章
文章代碼(AID): #15OIm8Ub (Biotech)