Re: [問題] 我養的huvec有怪點點

看板Biotech (生命科學)作者 (三跪九扣三跪九叩)時間19年前 (2007/01/30 09:19), 編輯推噓6(605)
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引述《tirecake (三跪九扣三跪九叩)》之銘言: : http://www.wretch.cc/album/show.php?i=foodfood&b=2&f=1319306505&p=0 : 正常 : http://www.wretch.cc/album/show.php?i=foodfood&b=2&f=1319306506&p=1 : 養的代數多了就會開始有點點 : 那些點點是什麼啊 : 一開始是一群一群數十顆 : 過四五天就會很多 但medium卻沒有什麼變化 : 原本這細胞的代謝物就很多 但這些點點是貼盤的 : 多到一種程度會整片漂起來 開始影響細胞生長 : 我的細胞是primary culture 現在約八代 長得超慢 推 sakuru:細菌污染,我之前就是這樣子 → sakuru:或是黴菌,你的medium應該會很快變黃吧?! 推 sakuru:而且你的細胞不太純的樣子耶,細胞濃度也太低了,會長不好 就是因為medium不太有變化 所以我才困惑 我看過污染到medium變色 裡頭有沙沙的混濁物 但跟我現在情形不同 細胞不太純?會不會是我的細胞變性了?(變成fibroblast) 因為這陣子我只養一種 濃度低是因為1.老代數了細胞變很大 2.點點的影響 推 apa9394:fibroblast SUBCULTURE 最好打成1顆顆的聚集成一片 → apa9394:一開始就有一小片的話有些其實已經不是monolayer... → apa9394:那團非"monolayer"會整團漂起來... 我整片漂起來的不是細胞 是那些點點 而黴漿菌汙染應該不容易看吧(應該比我的點點更小?) 我們是用倒立顯微鏡PH1看 黴漿菌在專用AGAR上有荷包蛋狀Colony 該不會是我之前上食研所的課 帶了sample回來污染到了 可是年輕細胞都不會有事 解凍後養三四代都很好 7~8代就開始了 另外我還想問 我的細胞會變大變老 以至於8代以後很難長滿 我們老師要我常常subculture這樣對嗎 一週一次-->一週兩次,且不是分盤,是重新seed回 因為每次叫起來再貼下去 就會犧牲掉一些細胞 代數增加很快 盤數卻沒有增加 不是更快到達細胞的壽命嗎 -- 駕一葉之扁舟 舉袍樽以相屬  寄蜉蝣於天地 渺滄海之一粟   哀吾生之須臾 羨長江之無窮    挾飛仙以遨遊 抱明月而長終     知不可乎驟得 託遺響於悲風 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 61.62.195.21

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前面污染的問題我沒看到無法解釋...
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後面subculture的思考方式我覺得要考慮至少要多少能長...
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我覺得有點像死細胞碎片
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我也是覺得是細胞碎片...
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依我養huvec的經驗,我覺得像是污染。 而至於subculture的
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問題, 一般實驗室使用huvec大約都只用到第五代
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,除非有特殊目的。所以你要不要先跟你們老師討論一下代數
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的問題呢? 確定一下他是不是另有目的... ^^
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你把細胞trypsin下來又種回去的目的在哪 ??
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我們老師說這樣比較不會老
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但我覺得這樣的說法怪怪的
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文章代碼(AID): #15lfqkCo (Biotech)
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