Re: [問題] 我養的huvec有怪點點
我也覺得是污染
我有一次類似的經驗,也是第5代的時候
(其實我懷疑是黴漿菌,但是我不敢確定)
medium一切都很正常,但是就是有小點點在裡面
我用抗生素殺過的隔天現象有改善
但是在放一天小點點又出現了
最後我就丟了
重新解凍新的..用的配方也都一樣..
小心一點之後這個現象就沒有出現過了
這細胞已經長的很慢了,讓他從一點點開始長到滿實在很為難他
另外我建議你兩天就要換一次medium
subculture的量要控制在第四天是8分滿的狀態下
4~5天做一次繼代培養
真的不能超過第8代,細胞都會變形
這樣他就會長的很健康了!!!
※ 引述《tirecake (三跪九扣三跪九叩)》之銘言：
: 引述《tirecake (三跪九扣三跪九叩)》之銘言：
: : http://www.wretch.cc/album/show.php?i=foodfood&b=2&f=1319306505&p=0
: : 正常
: : http://www.wretch.cc/album/show.php?i=foodfood&b=2&f=1319306506&p=1
: : 養的代數多了就會開始有點點
: : 那些點點是什麼啊
: : 一開始是一群一群數十顆
: : 過四五天就會很多 但medium卻沒有什麼變化
: : 原本這細胞的代謝物就很多 但這些點點是貼盤的
: : 多到一種程度會整片漂起來 開始影響細胞生長
: : 我的細胞是primary culture 現在約八代 長得超慢
: 推 sakuru:細菌污染，我之前就是這樣子
: → sakuru:或是黴菌，你的medium應該會很快變黃吧?!
: 推 sakuru:而且你的細胞不太純的樣子耶，細胞濃度也太低了，會長不好
: 就是因為medium不太有變化 所以我才困惑
: 我看過污染到medium變色 裡頭有沙沙的混濁物 但跟我現在情形不同
: 細胞不太純?會不會是我的細胞變性了?(變成fibroblast) 因為這陣子我只養一種
: 濃度低是因為1.老代數了細胞變很大 2.點點的影響
: 推 apa9394:fibroblast SUBCULTURE 最好打成１顆顆的聚集成一片
: → apa9394:一開始就有一小片的話有些其實已經不是monolayer...
: → apa9394:那團非"monolayer"會整團漂起來．．．
: 我整片漂起來的不是細胞 是那些點點
: 而黴漿菌汙染應該不容易看吧(應該比我的點點更小?) 我們是用倒立顯微鏡PH1看
: 黴漿菌在專用AGAR上有荷包蛋狀Colony
: 該不會是我之前上食研所的課 帶了sample回來污染到了
: 可是年輕細胞都不會有事 解凍後養三四代都很好 7~8代就開始了
: 另外我還想問
: 我的細胞會變大變老 以至於8代以後很難長滿
: 我們老師要我常常subculture這樣對嗎 一週一次-->一週兩次,且不是分盤,是重新seed回
: 因為每次叫起來再貼下去 就會犧牲掉一些細胞
: 代數增加很快 盤數卻沒有增加 不是更快到達細胞的壽命嗎
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