Re: [問題] 我養的huvec有怪點點

看板Biotech (生命科學)作者JeffreyS (念)時間19年前 (2007/01/31 14:16)推噓0(0推 0噓 0→)

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※ 引述《tirecake (三跪九扣三跪九叩)》之銘言： : ※ 引述《isotoper (想必是酸酸甜甜的吧)》之銘言： : : 看起來的確像是細菌污染沒錯 : : 不過有放大倍率更大的圖嗎? : 我有照過但200X就看不到點點呈黑色了看起來微凸黏在DISH : 不會動!!!!!!!! : http://www.wretch.cc/album/show.php?i=foodfood&b=2&f=1319306503&p=1 : 黑點點放大照 : http://www.wretch.cc/album/show.php?i=foodfood&b=2&f=1319306502&p=0 : 健康照 : http://www.wretch.cc/album/show.php?i=foodfood&b=2&f=1319306506&p=4 : 較低倍照 : http://www.wretch.cc/album/show.php?i=foodfood&b=2&f=1319306535&p=33 : 黑點點放大+細胞 : : 仔細看的話,細菌污染在細胞外會有顫動的小黑點 : : 如果是真菌汙染,大部分比較多yeast污染 : : 看起來在細胞外會有比細胞小的許多小圓球聚集成團 : : 據說黴漿菌汙染比較難辨別,因為黴漿菌又比一般細菌還小 : 我也覺得黴漿菌不會大到我用100X就看得到是否是霉漿菌污染可以用PCR check 有市售的kit 還滿容易使用的~~ ^^ 也可以用一般做免疫螢光染色的方法將細胞種在玻片上固定穿孔不過不用加一抗二抗只要染DNA (如hochest 33258) 再用油鏡看有沒有大量的藍色小點 (不過這個方法可以看到時代表已經污染的非常嚴重了XD) : yeast好像會讓medium看起來沙沙的 : 但我的medium其實沒有變酸細菌偏酸 yeast污染 medium是會變成粉紅色(偏鹼)霧狀高倍數可以看到出芽(這是yeast污染最明顯的特徵~) : 我還上網找過污染的圖不過都沒看過這種情形 : 說是代謝物或是細胞碎片應該也沒有像黑點點這麼規則這麼多 : 我的不會o/n就爆發要4~5天不換medium才會肉眼看見半透明的霧狀片漂浮 : 那些片是整片移動點點不會自轉也不會震動~~ 整片飄起來應該是死掉的細胞吧:p 用高倍看看吧~^^ (邊邊毛毛的有菌絲那就是真菌啦!!) : : 知道是哪種細菌,有相對應的方法解決 : : 如果這盤細胞真的很重要 : : 事情就不是重養那麼簡單了 : : 能的話,會希望能夠將污染情況降低(完全去除是不可能的) : : 然後才能做實驗 : : 但如果這盤細胞不是太重要,絕大多數都直接重養吧 : 我都有加P/S! : MEDIUM跟SUPPORT都是廠商買一組兩罐很好配碩士班時的實驗室也有養huvec 我們也有遇過類似的情形>"< 那時問老闆也問不出所以然後來是只要遇到這種情形那批細胞丟掉 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 210.58.169.35 ※ 編輯: JeffreyS 來自: 210.58.169.35 (01/31 16:37) ※ 編輯: JeffreyS 來自: 210.58.169.35 (01/31 16:41)