Re: [請益]請問如何表達toxic protein在BL21(DE3)ꤠ…
※ 引述《iamlittlee.bbs@ptt3.cc (go!go!!go!!!)》之銘言：
: 代po~~還請各位高手幫幫忙<(_ _)>
: --------------------------------------------
: 請問大家有overexpress cytotoxic protein的經驗嗎
: 我要overexpress的toxic protein,42kd
: 在BL21(DE)不太WORK
: 所以換到
: BL(pLysE)strain
: 第一次小量overexpression
先養到1L, (e.g. M9) OD>1.0 (2g α-D-Glucose/Glc)
然後再加IPTG(or 或用來induce的藥品）以及另外2g Glc.(if using
stock solution, then it's 10mL 20% (w/v) Glc)
Let me know, thanks!
: 有明顯的overexpression
: 再來就發現35kd左右的band被overexpressed了!!!
: 42kd的band就不見了
: 請問大家對toxic protein的overexpression有經驗的可以分享一下嗎
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
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