[討論] lysis buffer加下後有需要等半小時嗎?

看板Biotech (生命科學)作者 (墮天使)時間18年前 (2008/02/19 20:40), 編輯推噓6(605)
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嗯...我們實驗室是做neuron的,加lysis buffer後會冰上或冰箱等個30 min再刮 下定量,不過我生化的老師認為沒這個必要,一加就可以直接嚕,而且buffer量不用多, 只要刮刀有經過就好,不放心的話收集後冰上泡10 min也就算完全反應..... 我比較認同老師的想法,不過想多請教一下意見,如果真的一加就直接刮,我就要 把protocol修正一下了。 ===== 另外請問一個問題,如果要刮的dish很多,但刮刀不夠多,請問刮刀要怎麼重複用 而不會交互污染? -- 太初有道,道與耶和華同在,道就是耶和華。這道太初與耶和華同在。 萬物乃藉祂所造,凡被造的沒有一樣不是藉著祂所造的。生命在祂裡頭, 這生命就是人的光。光照在黑暗裡,黑暗卻不接受光。 吾輩乃生於黑暗,行於黑暗。因神之指引,行向光明;又因撒旦誘惑,回歸黑暗。 我不斷地徘徊於光明與黑暗之間,從被造之日至今,又自今直到那審判之日的來臨。 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 123.192.3.78

02/19 20:45, , 1F
我的作法是加完再sonication,老師的話,嘴砲居多...
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推樓上最後兩句 XDDDDDDD
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同一樓...
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02/19 20:53, , 4F
Lysis buffer+Freeze+Sonication
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不過我那位老師現在還和學生一起做實驗耶,western經常跑...
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喔~~~那您就試試看嚕
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不過要sonication也得先收集吧?你們有等那30 min嗎?
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02/19 21:35, , 8F
恩阿 刮下來後等30min後丟-80 隔天再拿出來打超音波
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我沒等..刮下來直接sonication
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02/20 14:16, , 10F
30mins for completely solve protein integrated
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02/20 14:20, , 11F
membrance specifically translocat phospho-protein
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文章代碼(AID): #17kiuvHv (Biotech)
文章代碼(AID): #17kiuvHv (Biotech)