Re: [討論] lysis buffer加下後有需要等半小時嗎？
看板Biotech (生命科學)作者artichoke (summerblue)時間18年前 (2008/02/19 21:24)推噓2(2推 0噓 2→)留言4則, 3人參與討論串2/2 (看更多)
※ 引述《LIAR (墮天使)》之銘言：
: 嗯...我們實驗室是做neuron的，加lysis buffer後會冰上或冰箱等個30 min再刮
: 下定量，不過我生化的老師認為沒這個必要，一加就可以直接嚕，而且buffer量不用多，
: 只要刮刀有經過就好，不放心的話收集後冰上泡10 min也就算完全反應.....
: 我比較認同老師的想法，不過想多請教一下意見，如果真的一加就直接刮，我就要
: 把protocol修正一下了。
: =====
: 另外請問一個問題，如果要刮的dish很多，但刮刀不夠多，請問刮刀要怎麼重複用
: 而不會交互污染？
正好我今天也在使用lysis buffer，所以手癢來回覆一下您的文章。
我是做pulmonary alveolar macrophage的。
我培養在35mm plate上，
加的lysis buffer量是100μl
放在冰上，大概左右搖晃20-30秒後，
用cell lifter(即刮刀)，完全的刮下來。
最後，
我是兩枝cell lifter輪流交替使用。
我把它們泡在內含400ml sDW的1000ml大燒杯內，輪流使用。
據本實驗室眾多學長姐的經驗，是沒有交互污染的問題存在。
以上，僅供您參考。
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 218.174.228.240
推
02/19 21:27, , 1F
02/19 21:27, 1F
→
02/19 22:02, , 2F
02/19 22:02, 2F
推
03/08 00:36, , 3F
03/08 00:36, 3F
→
03/08 00:37, , 4F
03/08 00:37, 4F
討論串 (同標題文章)
本文引述了以下文章的的內容：
完整討論串 (本文為第 2 之 2 篇)：
Biotech 近期熱門文章
PTT職涯區 即時熱門文章
13
22