Re: [求救] 有關cloning的問題
Hi,
有些白菌落可能是 false positive 的, 建議你把菌板在室溫或冰箱多放
幾個小時, 那些 false positive 的可能會再轉藍. 這時再去挑那些始終
都是白的菌落, 可能機率會大些.
一般來說, 大片段相對會比較難 clone 一點, 多挑幾個 colony 吧.
Good luck!
※ 引述《kvw (Je t'aime)》之銘言：
: 最近在做cloning
: 所要insert進去的片段大概是1700 bp
: 所使用的是p-GEMT easy vector
: 前面都很順利
: 後來挑了white colony
: 抽plasmid後 用PCR做confirm(老闆說這樣比較省錢)
: 結果出來 完全沒有insert
: 初步排除是X-Gal出問題
: 因為有藍有白還蠻多的
: 而其他inser進去的片段是400 bp的都成功
: 唯獨這個大片段的 挑了快20個white colony都沒有insert進去
: 有沒有人遇到這樣的情形 拜託幫幫忙
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