Re: [方法] 請問蛋白質濃度測定
※ 引述《muchmoa (...)》之銘言：
: 借用一下標題，
: 各位Bradford method蛋白質檢量線是每次要測未知物時都會新作一條嗎？
: 還是同一條檢量線一用就是幾個月呢？
: 最近發現自己和隔壁實驗室的分光光度計
: 隔一天測相同濃度的BSA吸收值可以差到0.03~0.06
: 另外，Sigma的Total Protein Kit是依據和標準品的吸收值比值來計算濃度
: 看配方也是Bradford method，可是沒有檢量線的情況下這樣準確嗎？
: 我們實驗室的檢量線做出來的截距都在0.015~0.025之間，
: 這樣就不是直接正比的關係了，還可以用Sigma的kit嗎？
: 請指教一下，謝謝!!
檢量線本來就是每次都要做吧？
我們用的是BCA protein assay，兩個reagent，加上37度的時間，由於沒有
end point，光這三個變因就很難完全一樣了，所以每次都要standard至少二重複，
除了pipeting有沒有準外，萬一臨時有事晚回來，整個時間就不一樣了.....
不過反過來說，如果沒有很要求準到很龜毛，或是「只想讓大家都一樣濃」，
這時我會偷懶，因為每次絕對值差不多)，只要OD還有線性，
甚至不放standard也OK，不過這種事絕對不可能寫到protocal就是了。
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太初有道，道與耶和華同在，道就是耶和華。這道太初與耶和華同在。
萬物乃藉祂所造，凡被造的沒有一樣不是藉著祂所造的。生命在祂裡頭，
這生命就是人的光。光照在黑暗裡，黑暗卻不接受光。
吾輩乃生於黑暗，行於黑暗。因神之指引，行向光明；又因撒旦誘惑，回歸黑暗。
我不斷地徘徊於光明與黑暗之間，從被造之日至今，又自今直到那審判之日的來臨。
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