Re: [求救] 免疫螢光染色
原PO辛苦了，先恭喜你改善染色結果
我也分享一下我染色的步驟，較為簡單省時
1. acetone fix 10 for mins(非pre-cooled，也只在室溫作用)
2. PBS wash for 5 mins * 3 times
3. 10% serum in PBS for 30 mins at RT
4. primary Ab(in 2% serum) 1 hr at RT or 4度C overnight
5. PBS wash
6. secondary Ab(in 2% serum) 1 hr at RT
7. PBS wash
8. nuclei counterstain
9. PBS wash
10.mount
在我參考的書籍中，有些步驟也加入了Triton X-100
但後來發現會使訊號減弱，所以我都省略掉 (因為我比較常碰到的問題是染不到)
我染的是T cell surface markers或一些tissue-specific antigen及viral antigen
目前在我手上，用這樣的染色步驟，大部分都可以染出來
供您參考，有錯誤還麻煩大家指正
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