Re: [求救] Pichia pastoris系統表現蛋白
※ 引述《molkna (孟克的吶喊)》之銘言：
: 大家好，
: 我目前在使用pichia pastoris表現系統表現病毒蛋白，
: 使用的vector是pGAPZa加上SMD1168 stain的酵母菌，
: 電穿孔後有挑到能生長在高抗生素的培養基上(Zeocin 2000ug/ml)，
: 但拿來表現蛋白後，不論是取100倍濃縮的上清液或是用玻璃珠打pellet，
: Westen blot都偵測不到。
: 培養條件是30度，270rpm搖兩到三天，
: 收取上清液濃縮100倍，
: Flask是燒凹角的三角錐形瓶(增加震盪)，
: 不知道有沒有在做相關研究的板友，
: 可站內信討論，相當感激!!
可以考慮換成aox表現量會比較好
或是用KM71H strain試試看
表現量好不好要依蛋白質不同而有很大差異
高抗性不一定高表現 但是高表現一般抗性都比較好
有每天加glucose去誘導嗎
最好每天取樣找到最佳誘導天數
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
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