Re: [求救] 蛋白質誘導不出來!!!

看板Biotech (生命科學)作者 (豆漿)時間16年前 (2010/05/20 00:45), 編輯推噓2(206)
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不好意思 想借這個標題問個問題 之前biingru網友有提到使用pET system時 在養許多代之後promotor的sequence會被重組 請問只要是使用T7 promotor, lac operator的表現方式 promotor gene都會被重組嗎? 或者說, 只要是使用T7 promotor, lac operator, ampicillin的 promotor都會被重組呢? 這些都屬於pET system嗎? 因為剛作這一塊, 實驗室沒有其他的學長姐可以問, 簡單的問題請別見怪 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.114.44.41

05/20 01:07, , 1F
表達基因的 promotor 會被重組
05/20 01:07, 1F

05/20 01:08, , 2F
不是 pET 的問題 是 BL21(DE3)會重組plasmid得promotor
05/20 01:08, 2F

05/20 01:48, , 3F
原來如此,那麼其他菌株的說明如果寫是BL21的衍生
05/20 01:48, 3F

05/20 01:48, , 4F
是不是也會有這樣的情形呢?
05/20 01:48, 4F

05/20 10:42, , 5F
要查一下該菌的菌種資料,看原廠有沒有做modification
05/20 10:42, 5F

05/22 23:30, , 6F
recA 本實驗室某株BL21(DE3)在第三代就突變了..
05/22 23:30, 6F

05/22 23:32, , 7F
然後不用加IPTG就可以表現蛋白 T__T
05/22 23:32, 7F

05/23 15:27, , 8F
host改用ecos21試試看(ecos21跟BL21(DE3)類似)不知行不行?
05/23 15:27, 8F
文章代碼(AID): #1Bz1MPR9 (Biotech)
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