Re: [問題]蛋白質的電泳
※ 引述《tryitnew (ken)》之銘言：
: 請問蛋白質電泳時，pH為什麼會有梯度的現象
: ，而不是均一的pH值呢？要如何決定蛋白質從
: 正極開始跑，還是負極呢？分離之後的蛋白質
: 要怎麼取出啊？
: 如果在蛋白質上染色，就可以用螢光來確定分離
: 出的蛋白質的量了嗎？文獻好像提到要用螢光強
: 度(fluoresence intensity)normalize
: 這是我看論文想到的問題，小弟不才，請各位大大
: 幫忙解惑。
你說的蛋白質電泳是指2D-PAGE嗎?
如果是的話，在跑1D的時候是依PI來分離蛋白質，我們也稱為IEF
每個蛋白質或多或少都有帶正電或負電，PI指的是蛋白質等電點為零時的PH值
跑完1D後，2D就依據MW大小來分離
我們會把跑完1D的膠條泡Equilibrtion buffer，
同時使它附上SDS(陰離子團，就是負電啦~)
所以我們都是從負電往正電跑喔~
取出就更簡單啦!有錢的和沒錢的XDD
有錢的-->機器手臂，沒錢的-->tip頭剪一剪，扣下去在吐出來就好了=ˇ=
我記得蛋白質定量不是靠螢光強度耶...
沒關係板上還有很多大大可以幫你解決問題XDDD
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