Re: [討論] Gene marker文章討論
看板Biotech (生命科學)作者mattmatt (乎哩乎哩 N N )時間14年前 (2011/07/06 01:43)推噓0(0推 0噓 0→)留言0則, 0人參與討論串3/3 (看更多)
※ 引述《churchfire (別小看我...)》之銘言:
: 小弟最近在研究gene marker
: 看到很多看似很淺但是確又很重要,讓我似懂非懂的詞
: SNP,單一何甘酸多型性,指的是基因序列中,單一何甘酸的變異。
: Genotyping,Genotype,
: 名詞:基因型,指的是基因的序列,型態!甚至是膠片上的片段pattern!
: 動詞:表示透過各種的實驗方式包含RFLP,RAPD,SNP等方法,了解基因的序列或型態!!
: Gene marker:基因分子標誌,指的是一個DNA片段,其位於染色體上,此片段可大可小,
: 小至SNP(僅有一個NT的差異),甚至是一整個片段的不同;
: 其功用在於區分細胞個體或是物種。其操作的形式也很多種包含:RFLP,AFLP,
: RAPD,SSR,SNP,RAD marker等。
: Question 1:以上,我想請教到底這三個怎麼串在一起阿?
: Answer:是說:gene marker的方式可以幫助人們了解genotype嗎?
: 而SNP,或是其他SSR,RFLP,AFLP等,都是幫助genotyping的方法!
: 我這樣說對嗎?
genotyping是方法,動作,指的是"分析物種的genotype"
方法就如你所述SSR RFLP AFLP SNP ITS IGS 16s等等...
而這些技術就是借用這些genome上面的marker來辨識物種的差異
例如兩種 或兩個strain...
就以分辨marker的有無,或者差異,來分辨不同種/strain
當然分辨的程度要看marker的"解析度"
例如同種分不同strain...就可能要利用SNP或mitochondrial dna
而分不同屬..可能RFLP或ITS即可
: Question 2:那這樣跟gene mapping有什麼差異??
: 我也看到了解這些可以幫助了解和疾病(或phenotype)和基因型間的關係
: 像是GWAS(genome-wide-association-study)
: 我知道大多數的SNP和及並有關係!但是我們要怎麼知道呢?
: High-throughput-screening的技術發達,我們可以很快的解序,
: 但是我們還是不容易明瞭序列的功能以及其與疾病(表型)!!
mapping指的是你想知道的基因,或者你想知道的marker
在染色體上的位置,或者gene-gene(marker-marker)之間的相對位置
比較強調在位置的關係上,當然藉由mapping之後,
知道這些基因 or Marker的(相對)位置,也有助於genotying
反著說:genotype不同,genome map就有可能不同
但這屬於比較早的名詞,在解序技術還沒那麼發達的時候
只能了解相對位置(或大概的位置)來了解genotype
當這些marker要扯到疾病(表型)的時候,勢必是要跟表型做連結
也就是拿你的樣本表型,跟基因型做對照,才能比較出不同表型對應的基因型
所有這些marker或是genotyping的最終目的,幾乎都是為了分辨表型的不同
反著說:為了知道表型的不同在基因層次上有何差異,所以做genotyping
: Question 3:我這樣說對嗎?我們拿到那麼多的SNP或是marker後,
: 我們要怎麼作後續的動作?
你說的對,但後續還有很大量的工作
也就是拿這些marker去跟表型做比對,才能拿到真正有意義的genotyping結果
也就是genotype與phenotype的關聯
這種工作非常繁複與龐大...有興趣可以看一下遺傳學
: Question 4:我也有問一位美國的教授,他說現在的解序技術太發達了!
: 我們可以很快的解序,但是如果要排列序列就很花時間!
: 請問通常都要做什麼實驗才可以知道其排列的位置?
: 我知道有透過"recombination rate"估算位置,以及物理性位置(Physical Mapping)
: 而吉隆米克斯最近推出的next-generation-sequencing,速度快
: 但基因片段重組,也是一個重要課題。
: 這位教授建議我:乾脆把需要的物種全部解序,這樣你就可以得到很多資訊了!!
: 你擁有這些需列資料,你也就有很多的東西可以玩了!!你也可以從中找到你想切入的方向!
我個人覺得解序與排列序列,現今都有電腦的幫忙,也有龐大的資料庫可以比對
如果你的物種不是太稀有,這絕對不是甚麼不可達成的目標
但如上面所說,這些結果勢必要跟表型做連結才有意義
也就是說,你看到了物種間的差異,或者是遺傳疾病的有無
這些不同點,你要如何利用genotyping的方法來分辨
當分辨的方法建立後,是不是可以利用建立好的方法來做檢測?
舉個例子:你觀察到一個遺傳性疾病,你想知道基因層次上是怎麼樣的造成的
於是你定了某個基因的序列,發現基因上有一個SNP的存在會造成這個疾病
於是這個SNP就成了marker,可以用來判別疾病的有無
接著你分析了數個樣本(有病與無病),證實了這個SNP(基因型)與疾病(表型)有關聯
你以後就可以藉由這個marker來判別樣本是不是具有疾病
這整個過程就是genotyping,貢獻就是建立了可供判別疾病有無的gene marker
(當然準確度還要依賴樣本數)
當然教授說的全部解序是最直接的辦法..當然也可以得到很多資訊
麻煩的就是你要如何從幾百(千/萬)筆的資料裡面,篩出你想要看到的東西
這如同大海撈針...非常不容易
但教授說的也沒錯,現在大家都這樣大規模的玩(靠電腦的幫忙),不然跟不上潮流
只是看你需要甚麼程度的marker,還是需要全解序,才能分析你想知道的東西
也就是解析力的不同
如同你直接用1000X倍的顯微鏡去找目標,總是看不到東西在哪
不如先用40X倍,先去看目標在哪,再慢慢拉高解析度,
挑選最適合你觀察的解析能力,再來解釋你觀察到的重點
以上淺見
: 以上是我最近閱讀的心得與感想,希望板上的大大先進
: 給予一些建議或是有用的文章!!幫助我了解更多!!
: 我有說錯的地方,也請不吝賜教,謝謝!!
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