[求救] 大鼠噬骨細胞Osteoclast primary culture
之前只有養過會貼附的細胞，這次比較大的挑戰是大鼠噬骨細胞的培養，
參考之前paper的作法，不過paper上寫的是小鼠的作法，
想說應該差不多，所以就照著方法作。
1.將大鼠腿骨取下，過酒精(15秒)，放進medium
2.用骨剪將腿骨兩端剪開，插入針頭用medium將細胞沖出。
3.用pipette 將細胞盡量沖散
4.離心3240rpm, 5min
5.吸去上清液後用medium懸浮。
6.利用ficoll去除紅血球，取中層單核細胞的部分。
7.將細胞養在flask，含25ng M-CSF
8.O/N 取懸浮細胞作培養，加入50ng的RANKL。
可是問題來了，我的細胞過了一個禮拜完全沒有形成大顆的噬骨細胞，
後來將細胞取出來用trypan blue看細胞到底是死的還是活的，發現細胞都是死掉的細胞。
之後又試了一次，將上面細胞液先抽出(我覺得上面很飄的應該是死細胞)
再加入新的medium，在shaker上37C 搖了3個小時。
結果還是沒細胞(冏)。
想問板上有沒有噬骨細胞培養高手可以解惑呢？
另外我想問dentin slice哪裡有賣，還是都是自己作比較多啊~~~
以上，拜託大家了!!
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