Re: [求救] perforated patch 的原理?

看板Biotech (生命科學)作者Euronymous (Escape!!)時間11年前 (2014/06/02 05:17)推噓2(2推 0噓 0→)

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※ 引述《peik35 (P)》之銘言： : 想請問一下,最近讀PAPER,有發現一個叫perforated patch(whole cell)technique : 在paper裡面,它是用來實驗,當添入某一藥劑時,currents與鈣離子通道的情形 : 因為本身不是做電生理相關,有些名詞搞不太清楚 : 如 1. perforated patch whole cell patch clamp 簡單來說就是讓玻璃針裡的溶液和細胞內液混合在一起，這時候整個細胞膜和上面的離子通道的電子性質就可以被控制和測量。 whole cell patch clamp有分兩種，rupture 和 peforated. rupture顧名思義就是把針間貼住的那塊細胞膜拉破，這樣玻璃針內的液體就可以灌進細胞。而perforated patch則是在玻璃針內放入amphotericin或nigericin。這兩種化合物可以溶掉細胞膜上的部脂質，只會讓某些小分子離子(Na K Cl H+) 通過細胞膜。這樣子玻璃針和整個細胞就會通電(路)，但細胞內的胞器就不會因為像rupture的狀況被破壞，也降低對細胞裡protein/enzyme濃度的影響由於鈣離子通道在細胞內的調控受到很多protein的影響，因此如果想要研究 protein對鈣離子通道的調控，perforated patch就是一個必需的方法。 : 2.還有data裡面有提到: inwardly-rectifying 和 outwardly-rectifying 這兩個 : 之間的差異是什麼? 離子通道當它"打開"時本身就是一個電阻，所以應該遵守歐姆定律。但偏偏事情並不單純。有些離子通道對於向細胞內的電流(inward current)乖乖遵守歐姆定律，有固定的電阻，但改變電壓讓電流外流後，電阻變大了，所以往外流的電流就比較小。簡單說就是這個離子通道偏好往內流的電流，內流通透性比外流通透性好，這就是inward rectify。反之亦然。 : 3. 另外這是paper上實驗的Data,http://ppt.cc/hIKy , 想請問X軸與Y軸各代表實驗 : 上的什麼結果呢? 如1所說，patch clamp就是把玻璃針裡的溶液和細胞連成一個電路，所以你可以控制細胞膜內外側的電位差。簡單來說，你可以把細胞膜當成電容，離子通道當成電阻，電容跟電阻並聯，然後在這個並聯的電阻和電容的電路上加一顆可變電壓的電池。X軸就是這顆電池的電壓變化。 Y軸就是在不同的電壓下所量到的通過細胞膜的電流。 : 謝謝大家幫忙! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 82.83.199.29 ※ 文章網址: http://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1401657437.A.56F.html ※ 編輯: Euronymous (82.83.199.29), 06/02/2014 05:19:16 ※ 編輯: Euronymous (82.83.199.29), 06/02/2014 05:21:43 ※ 編輯: Euronymous (82.83.199.29), 06/02/2014 05:33:51