Immunofluorescent 一直染不出來
想詢問各位大大
冷凍切片後
我染特定細胞的 receptor (tyrosine kinase receptor)
但染完都沒有我要看得細胞
應該說 POSITIVE 跟 NEGATIVE 是同樣亮度的
步驟如下
0.01 M PBS wash 5min*3
2% NGS-0.1% BSA- 0.2% Triton blocking 5 mins
10 % NGS-0.1% BSA- 0.2% Triton blocking 20 mins
0.01 M PBS wash 5min*3
add primary antibody overnight at 4 度C
0.01 M PBS wash 5min*3
add secondary antibody 30 mins
0.01 M PBS wash 5min*3
coverslip
一抗是新買的
想請各位知道哪裡出問題嗎?
感謝 > <
發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出
以方便板友幫您追蹤問題
若是求救事項涉及實驗室智慧財產(例如細胞細菌植株、質體載體等）之分讓，
請務必註明貴實驗室願意設立 正式合作或 簽署材料分讓協議(MTA)，否則版工將逕行刪除
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