[求救] 想請問有人有養過DC 2.4 cell嗎

看板Biotech (生命科學)作者 (努力向前)時間9年前 (2016/03/07 17:53), 編輯推噓4(4019)
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發問時請注意,若是要問實驗相關的問題,請將實驗的步驟、所用的條件大致列出 以方便板友幫您追蹤問題 若是求救事項涉及實驗室智慧財產(例如細胞細菌植株、質體載體等)之分讓, 請務必註明貴實驗室願意設立 正式合作 簽署材料分讓協議(MTA),否則版工將逕行刪除 ----請將上列注意事項以 ctrl + k 刪除後開始編輯文章---- 恩 最近回實驗室作實驗 第一次養DC 2.4 cell line 但是沒有看到這株細胞的相關培養詳細內容 我指的是 型態 培養詳細方法 (我知到培養液等等內容 paper上的 沒有在ATCC上看到這株細胞 也許是我的keyword不對) 目前解凍 換過一次培養液 把它用另一種樹突細胞來養 覺得這個細胞是懸浮型 因為不太貼 圓圓聚集 我是以懸浮細胞的方式來養 吸培養液=> PBS wash dish ==> 離心 1000rpm 5min ==>倒掉上清液==>稀釋養入10cm dish 如何看這類細胞長滿 沒有任何cytokines treat的狀態下 應該看不到樹突的延伸 就圓圓 飄阿飄 希望大家可以分享賜教一下 覺得它有點weak 感謝大家 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 118.232.15.219 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1457344385.A.2CF.html

03/09 14:37, , 1F
medium是用哪一種?配方可以貼上來看一下嗎?
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03/09 14:38, , 2F
這種細胞是貼附型的
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03/09 14:38, , 3F
細胞型態應該為紡錘型~有處理才會伸出樹突
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03/10 00:52, , 4F
學姐叫我自己查 但我沒找到觀察了一兩天 都不會貼
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the murine DC line,DC 2.4 adhere to the C57BL/6 bone
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medium RPMI 1640 with100U/ml(P/S) 2mM glutamine10%FBS
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恩 我覺得應該是懸浮型的 因為解凍後放三~四天細胞不太貼
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但還是沒死 我是用別人養DC cell line的方式養但不同細胞
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我找了很多但找不到這細胞的相關型態只好求救
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我之前碩班有養過DC2.4好像medium還有加其他東西2-ME跟N
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NEAA 丙酮酸 然後絕對不是懸浮~會飄就是死掉了~
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然後之後都是做primary culture去取骨髓讓單核球分化成
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樹突細胞~
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恩 透過同學找到一個碩班學生的論文 他說是半懸浮型的
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不過 今天先分成兩盤 比之前的貼附情況好點 明天再觀察
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照理講.. dc應該很會貼 給他一點時間?
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03/11 23:51, , 17F
恩會貼但沒有紡錘狀 就圓的 邊邊有小觸手爪盤子
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恩 就跟老師之前發的paper上的DC一樣
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03/11 23:52, , 19F
大家會去算細胞的doubling time嗎 今天學姐問我這
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我以前碩班不會去算這個 哈哈
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如果要算這個是要幾個時間點最理想呢 目前是想24 48 72 h
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03/12 00:14, , 22F
剛入手的細胞會去算 因為這樣週末才不用加班 XD
03/12 00:14, 22F

03/14 12:36, , 23F
我們實驗室有特別用liquid medium去養
03/14 12:36, 23F
文章代碼(AID): #1MtK-1BF (Biotech)
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