[求救] Wound healing assay Cell cycle的問題

看板Biotech (生命科學)作者 (Hsi06)時間9年前 (2016/03/16 11:11), 編輯推噓1(103)
留言4則, 3人參與, 最新討論串1/1
最近在repeat過去學長做過的wound healing assay(用culture insert) 是比較低惡性細胞跟高惡性細胞的migration速度 學長做的wound healing assay只擷取了0 24 33hr的data 但就照片看來,感覺就是細胞數變多把細胞推出來的樣子 而我現在的問題是, 我重複這個實驗,發現17小時真的一點點migration的跡象都沒有 已經做了三次都是這樣 一直到大約18hr細胞才開始有一點點往中間wound的位置跑 24小時開始更明顯 33小時簡直是炸出來了 我的問題是, 「這個實驗準確性究竟如何呢?」「有沒有什麼condition是我需要注意的?」 到底是因為cell cycle而把細胞推出來的,還是細胞真的migration了? 我一般培養這個細胞也是大約24hr分裂一次 我使用的culture insert是ibidi,每個well各種6*104 細胞跟細胞之間沒有很緊密,大約是八分滿的細胞量 沒有用其他方法處理細胞(低血清培養 or gene轉殖) 實驗菜鳥,還請各位多多指教 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 163.15.154.17 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1458097882.A.8ED.html

03/16 11:17, , 1F
同樣ibidi,3x10^4就滿了,可以先做MTT看對生長的影響
03/16 11:17, 1F

03/16 20:50, , 2F
ibidi的 有什麼特別之處嗎?我們是用其他牌子
03/16 20:50, 2F

03/18 00:21, , 3F
Culture insert應該都差不多,據學長說當初是挑便宜的買
03/18 00:21, 3F

03/18 00:22, , 4F
謝謝milk的分享,cell量我有嘗試過了,我們細胞6*10^4最剛好
03/18 00:22, 4F
文章代碼(AID): #1MwCxQZj (Biotech)
文章代碼(AID): #1MwCxQZj (Biotech)