Fw: [問題] recombinase 重組酶 DNA inversion

看板Biotech (生命科學)作者時間9年前 (2016/04/30 21:11), 編輯推噓0(0017)
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※ [本文轉錄自 Biology 看板 #1N8xwIve ] 作者: coolboychiu () 看板: Biology 標題: [問題] recombinase 重組酶 DNA inversion 時間: Sat Apr 30 04:05:34 2016 【問題】: 我們知道有些重組酶像phiC31可以產生不可逆的DNA翻轉,圖示如下 attP >^^^^^^^^> attB (>^^^^^^^^> 表示一段被attP和attB夾住的DNA序列) | | V attR <vvvvvvvv< attL (v 代表 ^ 反轉後的樣子) 如果現在DNA上有多組相同的attP-attB pairs,如下圖 attP_1 >^^^^seq 1^^^^> attB_1 ~~~~~~~~ attP_2 >^^^^seq 2^^^^> attB_2 (~~~~~~~~代表中間不重要的DNA序列 可長可短) 我在想這樣的結構應該attP_1和attB_2夾住的整個DNA序列也有機會整個被翻轉 我想請問各位的是: seq 1和seq 2個別被翻轉的機會會遠比整個序列一起被翻轉大得多嗎? 【問題起因】: 研究上碰到的 但我本身其實是念電子 老闆有興趣 我就被叫來做相關研究了 我已經查了一整天資料 但毫無所獲 到現在都還沒睡覺QQQQ 所以才想上來請問大家 如果有參考資料 方便的話 麻煩各位在提供給小弟了 沒有也沒關係 先謝謝大家了 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.112.218.11 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biology/M.1461960338.A.E68.html

04/30 10:59, , 1F
你把P,B,R,L的1跟2的ATCG序列拿來比對是怎麼轉變就了解了
04/30 10:59, 1F

04/30 11:03, , 2F
P1B1可轉成R1L1,但P1B2轉不出可用的R?L?阿
04/30 11:03, 2F

04/30 12:15, , 3F
謝謝樓上回答。但我是假設兩組attP和attB一模一樣 下
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04/30 12:16, , 4F
標1和2只是方便讓我解釋問題 那這樣attP1和attB2應
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該也可以變成attR和attL吧?
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ※ 轉錄者: coolboychiu (140.112.218.11), 04/30/2016 21:11:08

04/30 23:16, , 6F
因為1跟2是確實存在的序列命名,所以一般不會接重複的2組
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不過應該有如1個B配2個以上的P,目的是測試最偏好重組長度
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也就是seq1,seq2與中間spacer都會影響你要的答案
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04/30 23:26, , 9F
先向樓上抱歉我的命名(下標1 2)上造成誤解
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04/30 23:29, , 10F
也就是說被翻轉的是seq1還是seq2或整個序列 會依照
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重組酶最喜歡的長度來決定 是這樣嗎?
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是,若seq各為1bp,spacer為500bp,或對調一下,結果必不一致
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recombinase在DNA上結合需要空間,長度多少也是因素
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04/30 23:49, , 14F
非常感謝你的說明 你幫了我的大忙 感謝!!
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04/30 23:49, , 15F
你可以直接找paper,或查看invitrogen gateway系統的介紹
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04/30 23:51, , 16F
因為我根本不熟 所以我昨天加今天找了許多paper 但都
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04/30 23:51, , 17F
沒有看到相關的資料 謝謝樓上提供的資訊
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04/30 23:55, , 18F
另外弱弱的問一下 重組酶是有最佳重組長度 還是只要
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夠長足夠和DNA結合就可以了
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04/30 23:57, , 20F
如果是後者的話 那seq1 seq2夠長 好像就變成是一個
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04/30 23:57, , 21F
不能決定的問題了
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05/01 09:42, , 22F
實驗的東西,只有親自才知道
05/01 09:42, 22F
文章代碼(AID): #1N9Axk-D (Biotech)
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