[討論] 請問如何算colony numeber和轉殖siRNA?

看板Biotech (生命科學)作者 (joey2016)時間9年前 (2016/05/07 17:57), 9年前編輯推噓2(2013)
留言15則, 5人參與, 最新討論串1/1
請問培養癌細胞時,計算處理過siRNA的癌細胞的colony number步驟: cancer cell 處理A蛋白質的siRNA ↓ single cells were seeded in 6 well plates,600 cells/well (如何算一個well種600個cell?用細胞計數原理?) ↓ 算colony數目,50個癌細胞的才算一個colony。 (50個癌細胞要怎麼看?查前面的文章,意思好像是在顯微鏡下看,大小>0.2mm的colony 當作有50個癌細胞算出來,在顯微鏡下如何知道那個colony大小有>0.2mm呢) 問過做癌細胞的人,他們也不會回答…… 另外,現在把siRNA 送到癌細胞裡面,用lipofectamin 或用DC-nanoparticle 有差別嗎?哪一個效果比較好呢? 麻煩大家了~ 謝謝! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 1.174.150.82 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1462615032.A.24B.html ※ 編輯: joey2016 (1.174.150.82), 05/07/2016 17:58:07

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顯微鏡有比例尺
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第一個問題 建議你用序列稀釋,放大種的體積會比較準,
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至於transfection 我現在覺得最好用的是transIT-X2(Mirus
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的)
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Mirus推 有些細胞好送很多
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colony是要肉眼視野下數的,用比例尺看大小是屬顯微視野怎
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麼採用?
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原文刮弧是問在顯微鏡下看有沒有>0.2um
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50個細胞:剛開始看的時候可能先實際算個數
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等你算過幾個後 大概會有個概念 多大的有超過50個細胞
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而且 50個細胞算是一個設定值 你如果要設定更多細胞個數
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才能算是一個colony也可以,但就看怎麼設定
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或許 用比例尺比較客觀 但麻煩囉~
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因為我想到的步驟 可能是 你要先把影像截取下來
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再用比例尺去量測 這個步驟 就不知道要花多少時間了
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文章代碼(AID): #1NBRlu9B (Biotech)
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