[問題] 關於螢光標記
【問題】:
DNA螢光標記原理
【問題起因】:
最近再看一篇有關化學感測器,螢光放大的paper。
裡面提到將共軛高分子與ssDNA-C* (dye-labeled single-stranded DNA)形成錯合物
共軛高分子(CP)如同一個分子天線,會捕捉大量光子,
並且和C*產生FRET,接著C*會放出amplification 的螢光訊號。
上面這些是比較偏光化學的理論,這部分我的原理我很清楚。
我比較不清楚的地方是,為何要對單鼓DNA做螢光標記。
【個人看法】:
在化學感測器的設計上主要有兩個部分,一個是訊號傳輸單元另一個是辨識單元
辨識單元是用來探測特定的分子,
訊號傳輸單元是告訴我們辨識是否成功。
我認為對單鼓DNA做螢光標記是在其身上安裝一個訊號傳輸單元,讓單鼓DNA可發出螢光
方便我們確定辨識是否成功。
在DNA晶片上也是先安置了許多單鼓DNA
若今天我們將所測定的ssDNA-C*至於DNA晶片上
會使原本晶片上的單鼓DNA,和所測的的ssDNA-C*因為鹼基的A-T C-G配對特性
形成較穩定雙股DNA
這樣就完成了一個辨識過程,
為了確定測定的ssDNA-C*在晶片上的位置,
使用紫外光照射,使C*產生螢光,讓我們用來判斷ssDNA-C*在晶片上的位置
而前面所提到的共軛高分子只是用來幫助螢光放大而已,並不參與辨識過程。
以上這些是我對螢光標記得看法。
(結論:對待測的DNA標記發色團,藉由所發出螢光判斷其在DNA晶片上的位置)
我本身不是讀生物的,
雖然是念化學,可是領域並不在這裡,第一次接觸到螢光標記這個名詞有點疑惑
不清楚他的用意,
想請大家看看我的想法對不對。
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