Re: [問題] 關於溶解DNA
看板Biotech (生命科學)作者linzhengzhan (研究所:碩士班vs博士班)時間19年前 (2006/04/20 11:01)推噓0(0推 0噓 0→)留言0則, 0人參與討論串3/4 (看更多)
※ 引述《ppqu4 (屁啦)》之銘言:
: 請問DNA在用酒精濃縮後
: 有些protocal說可用TE buffer 溶解
TE buffer 利於長期何保存DNA (因為tris為good buffer,EDTA為metal的螯合劑)
可避免pH值的劇烈變化,亦可保護DNA不受DNase破壞。
: 也有的說可以用二次水 (有的說室溫也有的說4度C)
ddH2O可用於短期的回溶;如果想溶的又好又快,可以用ddH2O,但不利於長期保存。
回溶的溫度 (我的經驗)
→in Room Temperture,30min~overnight →store in 4℃
→in 37℃,1~1.5hr →操作實驗
→in 4℃,沒試過;我用4℃是用於保存DNA的
: 不曉得這三者有何差別?
: 而且有的還會建議說
: 用TE buffer溶的可以37度C加熱數分鐘幫助溶解
: 用二次水溶的可用56度C幫助溶解
只要DNA不denatur的話,高於常溫,應該是可以接受的 (重點是不要破壞DNA)
溫度的高低,只是回溶的效果與時間上的關係,只要時間夠,自然就能夠回溶完全。
: 請問為何會有溫度上的差別呢??
: 想知道原因是什麼?
: 懇請解惑 XD
: 謝謝
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你可以試一試,這是在下的方法
有問題請說或大家討論一下
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