Re: [問題] western blot 壓片的問題..
※ 引述《linker0726 (試著獨立)》之銘言：
: 今天壓片子的時候，perk的訊號很強..壓了5秒就很黑了
: 但是erk的壓了20分鐘完全沒有東西...
: 請問是哪裡出錯了....之前有成功壓出來過...
: erk的濃度是1:1000...
: 感謝
最近一直在押 ERK
你問的是protein的ERK1/2 還是phospho-ERK
ERK量比較少本來是要壓久一點 但20分鐘好像太久了
你的ECL有稀釋嗎？
ERK 1：1000算滿濃的 如果還出不來 你可能要檢查一下是不是1抗或2抗壞掉
抗體加入blocking buffer時 buffer溫度太高也不行
如果是phospho-ERK 又比ERK弱
我之前ERK和phospho-ERK 都用Santa Cruz
ERK還OK phospho-ERK有夠糟糕 壓了兩個月 看的到band
但雜band一堆 要不就是背景直很髒
就像之前版友講的 一樣狀況 聖誕牌很糟糕
跟老闆講又不太相信 一直叫我試條件
直到有其他老師跟他講說聖誕牌的會這樣他才相信
（好像是跟抗體不同批號有時候會出現特好或特壞的狀況）
最近換cell signaling 一下就出來拉 漂漂亮亮
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如果活在世上只是扮演著大家所期望的自己
那扮演好了又怎樣
不如靜靜的讓自己消失吧
總是多餘的存在只是種荒謬的錯誤
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