Re: protein無法induce
※ 引述《ROKEE (可不可以不要再胖下去啦~)》之銘言：
: ※ 引述《chianny.bbs@nculs.twbbs.org.tw (加油加油！！)》之銘言：
: : 我使用pGEX-KG來產GST fusion protein
: : sequence出來的結果是正確的
: : 但是在SDS-PAGE上沒有IPTG induction的痕跡
: : 不死心的用western blotting check
: : 可以偵測到GST和我的protein的signal
: : 有沒有人知道為什麼
: : 要怎麼解決?
: : 拜託知道的人解答一下 感激不盡!!
: 借標題用一下
: 想問一下版上的高手們
: 大家如果用pGEX系統做蛋白表現時
: 會用 bead 還是 column 純化呢?
: (ex:Glutathione sepharose 4B vs GSTrap FF)
: 又，如果要去掉fusion上的GST
: 假如用thrombin切除後，會再利用什麼方式針對target protein做分離?
: (gel filtration column? Benzamidine column? or...some else?)
"on column digestion"
可以有效分離你的蛋白和GST...
但是protease的量需要較多
不過前提是要能切....
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◆ From: 140.114.100.165
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08/06 14:34, , 2F
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