Re: [問題] SDS-PAGE跑膠 很多問
※ 引述《leondemon (狗狗)》之銘言：
: 我是第一次跑SDS-PAGE
: 跑PAGE的藥劑幾乎都是買新的~
: 藥品狀態如下:
: Running Buffer:放了一年的10倍stock(已開封)，跑膠前稀釋配置完畢。
: Acry/Bis:放了一年，未開封，一直躺在4度冰箱
: APS:新買藥粉，配了1CC，冰在-20冰箱
我以前這樣用,用一年以上還ok
: TEMED:新買藥劑，平時放在陰暗處，瓶子為褐色避光材質。
: SDS:新買藥粉，配了10%放在室溫
: Tris:新買藥粉，配了1.5M(pH=8.8)和0.5M(pH=6.8)放在4度冰箱
buffer可以放在室溫
: marker:新買，波士頓的protein marker，middle range，Cat NO:PT-PM01
: 目前問題:
: 1.我的marker完全沒有分層，可是我有放別人的marker，可以看到不同顏色的Band
: 是不是我的marker有問題，還是我買錯了?(什麼是prestained marker)
你的marker和別人家的是同一種的嗎?完全沒分層是因為沒跑開嗎??
新買的應該不會有問題
: 2.第一次製膠時，感覺膠體作的不是很好，雖然膠片有凝結，但是tube內的沒有
: 後來跟別人借Acry/Bis來重新配，也用自己的Acry/Bis配一管，兩管都有凝在Tube
: 但是感覺我的凝膠表面不是水平狀，但是別人的Acry/Bis配的，表面很平
在tube內不平也蠻正常的,load在玻璃片之後用水或2-propanol有壓平就好了
TEMED可以偷偷加多一點會凝的比較快...
: 3.在stacking時，每條lane的dye都會越來越胖，
: 隨著時間流逝，別人家的marker，band呈梯形狀，這樣正常嗎?
是loading buffer的關係嗎?每個well的loading buffer的量
最好一樣跑起來會比較好看(每個well都有load的話跑起來也會比較平)
: 4.APS粉末能否放在室溫??
: 藥劑/藥品在配置上和保存上有哪些要注意的??
我們粉末的就放在室溫...但其實APS應該都要fresh的比較好
但我們冰在-20度居然可以用個兩三年....
: 麻煩各位前輩幫忙了~
這是我的個人經驗啦!!!
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