Re: [問題] SDS-PAGE跑膠 很多問
※ 引述《leondemon (狗狗)》之銘言：
(friendly delete)
: 目前問題:
: 1.我的marker完全沒有分層，可是我有放別人的marker，可以看到不同顏色的Band
: 是不是我的marker有問題，還是我買錯了?(什麼是prestained marker)
prestained marker已有版友回答..
至於你的marker沒有分層會不會是因為不是prestained所以必須要染色才看的到
你看的到沒有分層可能是小分子dye
: 2.第一次製膠時，感覺膠體作的不是很好，雖然膠片有凝結，但是tube內的沒有
: 後來跟別人借Acry/Bis來重新配，也用自己的Acry/Bis配一管，兩管都有凝在Tube
: 但是感覺我的凝膠表面不是水平狀，但是別人的Acry/Bis配的，表面很平
你的表面指的是鑄膠的表面還是tube表面?
若是鑄膠表面記得runnung gel做好要壓水才會平..還有AP及TEMED的量加少一點
讓它凝固的時間增加也有助於膠體的平整
另外如果你指的是tube表面的話那當然是不平的
還有AP與空氣接觸會導致自由基失效膠凝不起來
所以你第一次鑄膠tube裡頭沒有凝固可能是有搖晃到..所以別太擔心
: 3.在stacking時，每條lane的dye都會越來越胖，
: 隨著時間流逝，別人家的marker，band呈梯形狀，這樣正常嗎?
你所謂的梯形是指smile形狀嗎?通常這個現象會產生的原因是
well兩邊的散熱較快中間較慢..所以中間的溫度較高protein跑的比較快所造成
如果是反過來的梯形那我就不知道是什麼因素..沒有看過這樣的形狀
: 4.APS粉末能否放在室溫??
: 藥劑/藥品在配置上和保存上有哪些要注意的??
已有板友回答..AP盡量維持新鮮現配，注意照光勿太強放在室溫是沒有問題的
: 麻煩各位前輩幫忙了~
有關SDS-PAGE原理可以參考這個網站寫的非常詳細
http://www.ruf.rice.edu/~bioslabs/studies/sds-page/gellab2.html
以上有錯誤請指教
另外祝你實驗順利:)
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※ 編輯: EsMirada 來自: 59.115.131.242 (09/16 16:11)
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