[求救] 有關gel extraction
小弟目前再做一個subclone
所以要把目前clone的plasmid中的insert用限制酉每處理
在用gel extraction kit把它elute出來
我首先使用EcoRI去切分離出兩個片段
vector(3k)+insert(~900bp)
在用BsaHI去處理第二刀Vector變兩個片段(~1200+~1800)
insert變成(~750bp+~150bp)兩個片段
而我要的事~750bp的片段
跑膠後很高興的把它切下來
用Qiagen gel extraction kit去elute
但是........
elute完的DNA去跑膠定量加check後
冏rz.....
它的片段跑到1000bp多了
做了好幾次都這樣
於是我不死心的把elute完的DNA去做限制酉每處理
用了EcoRI BsaHI EcoRI+BsaHI 三種切法
跑膠後發現都掉回我原本要的大小~750bp
跟老師和學長討論的結果是說他們做這麼久從沒發生過這種事情
請問有人有遇過嗎??或是有解決的方法嗎??
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