Re: [求救] 有關gel extraction

看板Biotech (生命科學)作者 (叫我老鼠王....-_-)時間19年前 (2006/11/20 10:50), 編輯推噓2(203)
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※ 引述《jay0404 (yuga)》之銘言: : 小弟目前再做一個subclone : 所以要把目前clone的plasmid中的insert用限制酉每處理 : 在用gel extraction kit把它elute出來 : 我首先使用EcoRI去切分離出兩個片段 : vector(3k)+insert(~900bp) : 在用BsaHI去處理第二刀Vector變兩個片段(~1200+~1800) : insert變成(~750bp+~150bp)兩個片段 : 而我要的事~750bp的片段 : 跑膠後很高興的把它切下來 : 用Qiagen gel extraction kit去elute : 但是........ : elute完的DNA去跑膠定量加check後 : 冏rz..... : 它的片段跑到1000bp多了 : 做了好幾次都這樣 : 於是我不死心的把elute完的DNA去做限制酉每處理 : 用了EcoRI BsaHI EcoRI+BsaHI 三種切法 : 跑膠後發現都掉回我原本要的大小~750bp 還有一段250bp的嘛?如果沒有方便告知你elute的片段是合方神聖? 詳細序列?如gene code? 0000~0000? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 210.58.54.177

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這個嗎..我做的是用Chip從印度山羌genomic DNA上
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抓下來的片段,目前推測試150bp的小片段黏回去了
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可是沒啥理由黏回去就是了,因為之前同一組kit
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同樣的sample她有成功過只是那次做的subclone沒成功
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所以才要再做一次卻又一直出現奇怪的情況
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文章代碼(AID): #15OHVb_I (Biotech)
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